目的:揭示新型重组人内皮抑素(Endostar,恩度)与细胞毒药物顺铂联合使用的抗血管形成作用,探讨联合用药方式产生协同作用的分子机制。方法:在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养体系上,通过增殖抑制分析、克隆形成分析、诱导凋亡、迁徙/侵袭分析以及管道形成研究,系统地考察恩度联合顺铂抑制血管形成的作用,并以鸡胚尿囊膜(CAM)模型观察和评价联合用药方式的抗血管形成特点。其后,以DNA微阵列技术展示不同药物干预HUVECs的早期基因表达谱,鉴定出重要的调节血管形成的效应基因,探讨这些基因在联合用药时发挥抗血管形成增效作用的分子机制。最后,以实时定量RT-PCR验证目标基因的表达。结果:恩度与顺铂联合使用在体外有协同抑制血管形成的作用,这种协同作用具有血管内皮细胞特异性。CAM分析表明恩度有显著的抗血管形成活性,其效应与剂量之间无线性关系,恩度与顺铂联合使用在体内也显示出协同的抗血管形成作用。通过基因表达谱研究,筛选出一些参与血管形成增效作用的重要基因,如JUNB、GATA2、INSR、F7和WNT1等。实时定量RT-PCR的验证结果与目标基因的芯片资料基本吻合。结论:恩度与顺铂联合使用具有协同的抗血管形成作用,其分子机制涉及到对上述重要基因表达的调节,这些基因可能通过VEGF/VEGFR信号途径、凝血级联以及WNT信号途径等参与抗血管形成的增效作用。