目的:本研究基于多肽FFKY（FY4）的自组装特性,结合聚集诱导发光技术（AIE）,构建了谷胱甘肽/酸（GSH/pH）双敏感的纳米载体聚乙二醇-二硫键-FY4-腙键-四苯乙烯（PEG-Pep-TPE）,在实现肿瘤细胞内生物刺激响应性释放化疗药物（DOX）的同时,实时监测药物释放速率,同时纳米载体解体后的多肽自组装形成纤维,可进一步发挥化疗的协同作用。此外,结合巨噬细胞免疫治疗,采用CD47靶向肽（4N1K）修饰FY4,构建了具有低氧响应性的纳米载体4N1K-FY4-偶氮苯-PEG（4N1K-FY4-Azo-PEG,PAP）用于抗肿瘤生长和转移的研究。方法:结合肿瘤组织低pH、高GSH以及低氧等特性,将具有自组装特性的多肽FY4一端连接亲水性聚合物PEG,另一端分别与聚集诱导发光（AIE）分子（TPE-CHO）或CD47靶向肽4N1K相连,最终分别得到PEG-Pep-TPE或4N1K-FY4-Azo-PEG（以下简称PAP）。通过核磁共振（NMR）、红外光谱（IR）和质谱（MS）等对合成产物进行结构确证,并对纳米制剂的粒径形态等理化性质进行表征。通过紫外-可见分光光度计（UV/NIS）、激光粒度仪（DLS）、透射电镜（TEM）以及扫描电镜（SEM）等技术手段,分别从体外理化模拟、肿瘤细胞模型方面对纳米制剂的低氧、GSH/pH响应性进行考察。通过荧光分光光度计和UV/NIS对纳米载体PEGPep-TPE的AIE/FRET等光学性质进行考察,在荧光共聚焦显微镜下,通过受体光漂白法、光谱法和敏化发射法对药物DOX的释放进行实时量化监测研究。采用MTT染色法对阿霉素和纳米载体解体后自组装形成的纳米纤维的细胞毒性进行评价,初步探讨胞内多肽自组装纳米纤维的化疗协同作用机制。结合巨噬细胞免疫构建了PAP纳米制剂,通过显微镜观察和流式细胞术,在体外B16F10细胞模型上,研究其封闭肿瘤细胞表面CD47及促巨噬细胞吞噬的能力,探讨其对肿瘤细胞侵袭转移的抑制作用。同时建立荷B16F10肿瘤C57小鼠模型,联合化疗,研究PAP纳米制剂对肿瘤生长和转移的抑制作用,并对肿瘤内相关因子进行考察。结果:成功制备了GSH/pH响应性的PEG-Pep-TPE纳米载体和低氧响应性的PAP纳米载体,呈类球形,粒径在150 nm左右。体外光学性质测定及共聚焦荧光分析结果证实,PEG-Pep-TPE纳米载体具备AIE/FRET效应,可用于实时监测药物释放,且MTT实验结果显示胞内多肽自组装纳米纤维发挥一定的化疗协同作用。共聚焦显微镜观察、流式细胞术分析以及体内抑瘤研究证实PAP纳米制剂能够有效地封闭肿瘤细胞表面表达的CD47分子,从而促进巨噬细胞对其的吞噬作用;联合少量化疗药物能够显著性抑制肿瘤生长,可以达到多次化疗所产生的抗肿瘤效果,从而减少化疗中的药物剂量,降低其毒副作用;体外划痕实验以及体内抑制肿瘤转移实验结果显示,PAP纳米制剂能抑制肿瘤血管新生、上调E-钙粘蛋白的表达以及在肿瘤部位响应性解体自组装形成多肽纤维,有效地抑制肿瘤的侵袭和转移。结论:PEG-Pep-TPE纳米制剂具有GSH/pH响应性,在肿瘤细胞内自组装形成多肽纳米纤维发挥化疗协同作用的同时,还可通过AIE/FRET效应,实时监测药物的释放,为纳米递药系统中药物释放的相关研究提供新的技术平台和理论支持。PAP纳米制剂具有低氧响应性,其在肿瘤组织内自组装形成的多肽纤维可有效封闭肿瘤细胞表面的CD47分子,从而促进巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用,最终实现抑制肿瘤生长和转移的目的。