大黄蛰虫片质量控制标准研究

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大黄蛰虫片出自汉代名医张仲景所著《金匮要略》中的经典名方大黄蛰虫丸,具有活血破瘀,通经消痞之功效,临床应用广泛。处方中12味均以原药细粉入药。本文通过建立处方中大黄、黄芩、白芍、甘草的TLC鉴别方法,游离大黄素、游离大黄酚、总大黄素和总大黄酚的HPLC含量测定方法,对大黄蛰虫片质量控制标准进行了研究。第一部分大黄、黄芩、甘草、白芍的薄层色谱法鉴别目的:对大黄蛰虫片中大黄、黄芩、甘草、白芍进行薄层色谱鉴别方法研究。方法:以大黄蛰虫片中大黄、黄芩、甘草和白芍成分为主要检测目标,通过此四味中药的对照药材和阴性对照,分别对大黄蛰虫片进行薄层色谱鉴别。结果:(1)大黄薄层色谱鉴别结果所得色谱斑点清晰、分离较好,且无阴性干扰。(2)黄芩薄层色谱鉴别结果所得色谱斑点不是太清晰、分离度欠佳,但是阴性无干扰。(3)甘草薄层色谱鉴别结果所得色谱斑点清晰、分离较好,且无阴性干扰。(4)白芍薄层色谱鉴别结果所得色谱斑点欠清晰,分离欠佳,但是无阴性干扰。结论:建立的大黄、甘草薄层色谱鉴别方法较好,黄芩及白芍的薄层色谱鉴别方法还不够完善,可从提取方法、展开剂配比和点样量等方面进行进一步探索和研究。第二部分高效液相色谱法测定大黄蛰虫片中游离大黄素、游离大黄酚的含量目的:建立大黄蛰虫片中游离大黄素、游离大黄酚高效液相含量测定的方法。方法:从色谱条件、提取条件、取样量等方面对游离大黄素、游离大黄酚进行高效液相法含量测定方法的考察研究和方法学验证。结果:用ODS柱,以乙腈-甲醇-0.1%磷酸为流动相,采用等度洗脱,254nm波长的色谱条件;采用甲醇为提取溶剂,超声30min的提取方法;取样量0.5g进行大黄蛰虫片中游离大黄素和大黄酚的含量测定。此方法专属性强,大黄素、大黄酚的峰纯度均符合要求,线性关系、重复性、回收率、稳定性、耐用性均良好。结论:建立的大黄蛰虫片中游离大黄素、游离大黄酚高效液相含量测定方法专属性强、方法简单、结果可靠。此方法可行。第三部分高效液相色谱法测定大黄蛰虫片中总大黄素、总大黄酚的含量目的:建立大黄蛰虫片中总大黄素、总大黄酚高效液相含量测定的方法。方法:从色谱条件、提取方法、取样量等方面对总大黄素、总大黄酚进行高效液相法含量测定方法的考察研究和方法学验证。结果:用ODS柱,以乙腈-甲醇-0.1%磷酸为流动相,采用等度洗脱,254nm波长的色谱条件;采用甲醇-盐酸(10:1)为提取溶剂,80℃水浴回流30min,精密量取5ml续滤液于10ml容量瓶中,加入2﹪Na OH溶液2ml的提取方法;取样量0.5g进行大黄蛰虫片中总大黄素和大黄酚的含量测定。此方法专属性强,大黄素、大黄酚的峰纯度均符合要求,线性关系、重复性、回收率、稳定性、耐用性均良好。结论:建立的大黄蛰虫片中总大黄素、总大黄酚高效液相含量测定方法专属性强、方法简单、结果可靠。此方法可行。
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