2011年后我国出现PRV（pseudorabies virus,伪狂犬病毒）变异毒株,很多猪场出现免疫失败现象。为了解云南省PR流行毒株类型及流行情况,并针对云南省PR（pseudorabies,伪狂犬病）流行株进行疫苗免疫效果评价。本研究统计分析云南省猪群2019～2021年PRV g E抗体阳性率,使用PCR方法检测2020～2021年云南省不同规模猪场样品,了解PR感染情况,对阳性病料进行病毒分离并鉴定病毒类型。在此基础上,使用三种商品化PR疫苗免疫白兔后,用细胞中和试验来评价疫苗对所分离的云南流行株的免疫效果,为云南省猪场选择和使用疫苗提供理论支持。主要结果如下:1、统计云南省2019～2021年2036份血清样品PRV g E抗体结果,发现阳性份数为449份,总阳性率为22.1%,三年阳性率分别为20.1%、25.8%和11.2%。使用实验室已建立的PRV PCR特异性检测方法,对2020～2021年收集自云南省11个州市165个不同规模猪场的558份不同类型样品进行检测,结果显示:共检测到来自74个猪场的140份PR阳性样本,阳性率为25.1%,11个州/市PR阳性率在10.0%～47.4%之间,其中文山州、曲靖市阳性率较高,分别为47.4%和31.4%。对74个PR阳性猪场进行免疫背景调查,免疫Bartha-K61基因缺失活疫苗和HB98基因缺失活疫苗的猪场最多,占比分别为54.1%和18.9%。2、经混合感染检测,将获得的单一感染PR的样品,经研磨、过滤后接种至PK-15细胞。盲传三代后开始出现细胞圆缩、聚集融合等PRV典型的CPE,用q PCR方法检测每代病毒拷贝量,随着培养代次的增加,病毒拷贝量逐渐升高,至第六代后趋于稳定,经测定,病毒滴度为10-6.61TCID50/0.1 ml。通过g E基因测序、同源性分析、遗传进化分析,所分离的毒株为PRV变异株,命名为YN-Z。3、分别用经典毒株疫苗Bartha-K61基因缺失活疫苗和HB98基因缺失活疫苗,变异毒株疫苗HN1201-△g E基因缺失灭活疫苗免疫白兔,采集二次免疫后14d的白兔血清,将三种疫苗的抗血清稀释至相同抗体水平后,分别与YN-Z株感作后接入PK15细胞,并用用q PCR方法检测病毒拷贝量,结果显示:对比病毒对照组,三种商品化PR疫苗对PR变异毒株均有中和能力。相同抗体水平的抗血清下,变异株疫苗对PR变异毒株的中和能力优于经典株疫苗。因此可推断出,经典毒株疫苗能够对细胞产生免疫保护,但在相同水平的抗血清时,变异毒株疫苗对PR变异毒株的中和能力最好。综上,云南省存在PR变异毒株,并出现猪场PR疫苗免疫失败现象,为确保疫苗的免疫效果,建议猪场在使用经典株疫苗时可以合理增加免疫次数,对于PRV变异毒株阳性猪场,可以使用变异株疫苗进行防控。