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目的产前诊断是指利用各种诊断技术,对胎儿疾病作出宫内诊断。由于比血清学筛查具有更高的灵敏度及更低的假阳性率,无创产前检测(Noninvasive Prenatal Testing,NIPT)被认为是一种更安全、快速、准确的筛查方法。本研究主要通过分析江门市中心医院产前诊断中心2014年至2017年的相关数据,对NIPT的相关情况作出分析与讨论。方法1、选取2014年至2017年期间在江门市中心医院产科就诊,经过充分告知后,自愿接受NIPT检查,并签署《无创产前检测(NIPT)知情同意书》的孕妇,共20670例,其中单胎19908例,年龄31.08±5.14,孕周15.86±3.93;双胎762例,年龄30.63±4.18,孕周14.89±3.06。单绒毛膜双胎26例(3.41%),双绒毛膜双胎736例(96.59%)。2、样本采集:抽取5 m L孕妇的外周静脉血置入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管,8 h内经二步分离法获得血浆,于-80℃冰箱内进行保存。3、实验室操作流程:1)DNA提取与分段:血浆分离->DNA上机提取->DNA片段末端修复;2)DNA片段扩增(纳米球技术):加接头序列->PCR扩增->pooling文库->DNA单链制备及环化->DNB滚环扩增->形成DNA纳米球;3)DNA序列识别:DNA纳米球附着芯片->组合探针锚定连接法测序;4)分析:碱基读取->数据比对和组装->染色体三体分析->结果审核;4、通过深圳华大公司自主研发的生物信息分析方式,使用t值和L值来判断染色体非整倍体(主要包括21三体、18三体及13三体)的风险。筛查高风险的病例,必须通过侵入性产前诊断抽取胎儿羊水或脐带血,或引产后取胎儿组织,行核型分析或染色体基因芯片分析(Chromosomal Microarray Analysis,CMA),明确诊断。结果1单胎妊娠1.1 NIPT提示T21/T18/T13高风险共108例,经产前诊断或产后核型分析结果与NIPT结果相符者93例,阳性预测值86.11%,假阳性率0.07%,灵敏度为100%。其中T21阳性预测值为94.81%,假阳性率0.02%,灵敏度100%;T18阳性预测值为82.35%,假阳性率0.02%,灵敏度100%;T13阳性预测值为50%,假阳性率0.04%,灵敏度为100%。1.2 NIPT筛查除21、18、13三对染色体以外的常染色体非整倍体异常的阳性预测值10.53%,假阳性率0.09%,灵敏度为100%。1.3 NIPT对性染色体数目异常筛查的阳性预测值56.92%,假阳性率0.14%,灵敏度为100%。其中筛查性染色体增多的阳性预测值92.86%,假阳性率0.01%,灵敏度100%。筛查性染色体减少的阳性预测值27.03%,假阳性率0.14%,特异度99.86%,灵敏度100%。1.4 NIPT筛查拷贝数变异(Copy Numbervariations,CNVs)的阳性预测值33.33%,假阳性率0.17%,灵敏度为100%。2双胎妊娠:NIPT对于双胎妊娠胎儿染色体非整倍体的筛查阳性预测值75%,假阳性率0.26%,灵敏度为100%。3单胎妊娠与双胎妊娠在取样年龄、孕周方面无显著性差异。主要进行检测的T21/T18/T13,双胎妊娠的阳性预测值(75%)低于单胎妊娠(86.11%),假阳性率(0.26%)高于单胎妊娠(0.07%),差异无统计学意义。结论1与血清学筛查相比,NIPT的阳性预测值明显更高,假阳性率更低,有利于减少侵入性产前诊断的比例。2 NIPT存在一定的假阳性与假阴性,因此只能作为胎儿染色体非整倍体的筛查手段,侵入性产前诊断(包括绒毛活检、羊膜腔穿刺、脐带穿刺等)才是胎儿染色体异常诊断的金标准。3随着NGS的发展,NIPT已不仅仅可检测T21/T18/T13,对于性染色体数量异常(尤其是性染色体数量增多)、CNVs的检测效果理想,值得在临床上进行推广。4利用NIPT对双胎妊娠的胎儿染色体非整倍体筛查的准确性接近于单胎妊娠,可作为双胎妊娠产前筛查的首选。5在临床应用NIPT时,也要注意对孕产妇及家属做好充分的病情告知,尤其是NIPT的局限性。