五味子优良品种筛选及木脂素类成分的制备研究

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五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill,习称“北五味子”,主要分布于东北、华北等地。其入药部位为果实,因其果实具酸、甘、苦、辛、咸五味而得名。由于五味子具有多项药理作用和多种有效成分,因而具有广泛的医药市场前景。木脂素类成分是五味子的主要药用成分,具有保肝、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老等作用。本文以五味子为研究对象,主要研究结果如下:1.建立了五味子优良品种筛选的模式识别方法。通过超高效液相色谱法,对来自通化地区的30个不同品种五味子样品中5种主要的木脂素成分进行测定,同时考察其抗氧化活性。对所得数据进行聚类分析和主成分分析,并且通过逐步判别分析建立判别函数,从而筛选五味子优良品种。主成分分析和聚类结果基本一致,均将样品分为3大类,逐步判别分析的正确率高达90%。2.应用正交试验的方法筛选五味子超声波提取工艺,并且利用D101大孔树脂纯化总木脂素。确定最佳提取条件为:10倍量80%乙醇,60min提取1次。D101大孔树脂柱纯化最佳工艺为:上样液浓度为1.01mg/mL时,最大上样量为6倍柱体积,洗脱流速1.0mL/min,蒸馏水洗脱体积为9倍柱体积,洗脱剂采用80%乙醇用量为7倍柱体积。总木脂素含量可达到64.78%,表明此法能够达到初步纯化五味子木脂素的目的。3.首次利用高速逆流色谱一次性分离制备五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲和五味子甲素4种木脂素成分。以溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(9:1:5:5)的上相为固定相,下相为流动相,流速2.0mL/min,转速900r/min,运行150min后以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(9:1:9:5)的下相为流动相。经UPLC纯度检测,五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲及五味子甲素纯度分别为:98.74%、99.53%、94.23%和98.68%。4.考察五味子超声提取物对小鼠酒精性肝损伤的影响。实验结果表明:五味子超声提取物显著的降低肝组织中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,并显著提高乙醇脱氢酶(ADH)活性。实验结果提示五味子具有解酒护肝作用。
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