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目的:对22例乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)阳性的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者肝癌组织及癌周组织中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)X基因进行检测并对其常见变异位点进行基因测序分析,以探讨HBV X基因及其变异与原发性肝细胞癌发生发展的关系。 方法:利用Primer Premier5.0引物设计软件设计针对HBV X基因序列特异的引物,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)方法检测22例原发性肝细胞癌患者癌组织及癌周组织中HBV X基因,并对PCR扩增产物进行基因测序分析以了解常见变异位点1762位及1764位有无变异,同时检测5例正常肝脏组织中HBV X基因,并进行统计学分析。 结果:22例原发性肝细胞癌患者癌组织及癌周组织中 HBV X基因检出率分别为68.18%(15/22)和77.27%(17/22),68.18%(15/22)的肝癌患者癌组织及癌周组织中同时检测到HBV X基因,5例正常肝脏组织中均未检测到HBV X基因。癌组织及癌周组织中HBV X基因检出率均很高(P值均小于0.0125),而HBV X基因在癌组织与癌周组织的阳性率没有明显差异(P>0.0125)。癌组织及癌周组织中HBV X基因发生1762T/1764A双突变率分别为93.33%(14/15)和47.06%(8/17),40%(6/15)的肝癌患者癌组织及癌周组织中同时检测到1762T/1764A双突变,未发现1762T及1764A单独发生突变,肝癌组织中双突变率要明显高于癌周组织(P<0.05)。1762T/1764A双突变与乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen, HBeAg)阴性及患者临床病理之间无明显相关性(P>0.05)。 结论:原发性肝细胞癌患者癌组织及癌周组织中HBV X基因检出率均很高,癌组织中其常见变异位点发生1762T/1764A双突变频率很高, HBV X基因及1762T/1764A双突变与原发性肝细胞癌的发生可能有重要关系。