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目的 初步探索低强度脉冲超声(Low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对SD大鼠应用细胞周期M期特异性药物多烯紫杉醇、G2期特异性药物依托泊苷化疗所致骨髓抑制的影响,并且检测LIPUS治疗后相关造血因子的变化,探讨其恢复骨髓造血功能的可能机制,为LIPUS用于临床化疗所致骨髓抑制的治疗提供理论依据。方法 1.筛选建立白细胞减少症模型的适宜剂量。SD大鼠腹腔注射多烯紫杉醇进行化疗,剂量为25、50、100mg/kg,连续注射4天,在化疗的第0、4、7、14天(化疗前为第0天,化疗结束为第4天)检测血常规,观察三种药物剂量化疗后血细胞的变化。2.应用多烯紫杉醇(100mg/kg)对SD大鼠进行腹腔注射,连续注射4天,建立大鼠白细胞减少症模型,并随机分为两组:对照组(n=45)与LIPUS组(n=45)。对LIPUS组大鼠的一侧股骨干骺端进行超声辐照,辐照参数:声强200mW/cm~2、频率0.3MHz、重复频率1kHz、占空比20%,每天辐照20分钟,连续辐照7天,对照组大鼠进行假辐照。在化疗的第0、4、8、11、18天(化疗前为第0天,化疗结束为第4天),检测两组大鼠血常规和免疫球蛋白,观察LIPUS治疗对化疗所致骨髓抑制的血细胞和免疫功能的影响。3.应用依托泊苷(110mg/kg)对SD大鼠进行腹腔注射,建立大鼠白细胞减少症模型,并随机分为两组:对照组(n=45)与LIPUS组(n=45)。超声辐照LIPUS组大鼠的一侧股骨干骺端,辐照参数:声强200mW/cm~2、频率0.3MHz、重复频率1kHz、占空比20%,每天辐照20分钟,连续辐照7天,对照组大鼠进行假辐照。在化疗的第0、4、8、11、18天(化疗前为第0天,化疗结束为第4天),检测两组大鼠血常规和免疫球蛋白,观察LIPUS治疗对化疗所致骨髓抑制的血细胞和免疫功能的影响。4.探讨骨髓造血功能恢复的机制。多烯紫杉醇(100mg/kg)、依托泊苷化疗的第0、4、8、11、18天,用ELISA法检测对照组与LIPUS组大鼠血清中IL-6和G-CSF的变化,实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测与骨髓造血相关的干细胞因子(Stem cell factor,SCF)、细胞间粘附分子(Intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和血管细胞粘附分子(Vascular cell adhesion molecule-1,vcam-1)的变化,并对大鼠骨髓进行HE染色,观察骨髓造血组织的变化情况。结果 1.应用多烯紫杉醇(25mg/kg)和多烯紫杉醇(50mg/kg)化疗的第4、7、14天,外周血白细胞的数量与第0天(化疗前)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。应用多烯紫杉醇(100mg/kg)化疗的第4、7、14天,与第0天相比,外周血白细胞数量显著下降(P<0.05)。2.在应用多烯紫杉醇(100mg/kg)化疗的第11天与第18天,与对照组相比,LIPUS组大鼠外周血白细胞数增加(P<0.05)。化疗的第8天与第18天,与对照组相比,LIPUS组大鼠外周血中性粒细胞数增加(P<0.05)。化疗的第8天与第11天,LIPUS组大鼠外周血淋巴细胞与IgA的水平增加(P<0.05)。化疗的第8天,LIPUS组大鼠血清IgG的水平增加(P<0.05)。3.依托泊苷(110mg/kg)化疗的第8天与第18天,与对照组相比,LIPUS组大鼠外周血白细胞的数量增加(P<0.05)。化疗的第18天,与对照组相比,LIPUS组大鼠外周血中性粒细胞和淋巴细胞的数量增加(P<0.05)。LIPUS组大鼠血清IgA水平在化疗的第11天,IgM、IgG水平在化疗的第8天、11天和18天,与对照组相比显著增加(P<0.05)。4.在应用多烯紫杉醇(100mg/kg)、依托泊苷(110mg/kg)化疗的第8、11天,与对照组相比,LIPUS组大鼠骨髓SCF、ICAM-1的mRNA的相对表达水平增加(P<0.05),VCAM-1的表达水平降低(P<0.05)。在多烯紫杉醇(100mg/kg)和依托泊苷(110mg/kg)化疗的第8、11、18天,LIPUS组大鼠血清G-CSF表达水平升高(P<0.05),用多烯紫杉醇(100mg/kg)化疗的第11、18天,LIPUS组大鼠血清IL-6的表达水平降低(P<0.01)。多烯紫杉醇(100mg/kg)和依托泊苷(110mg/kg)化疗的第11、18天,与对照组相比,LIPUS组大鼠骨髓有核细胞数增加(P<0.05)。结论 LIPUS可以增加M期特异性药物多烯紫杉醇、G2期特异性药物依托泊苷化疗所致骨髓抑制大鼠的外周血白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量,增加血清中免疫球蛋白的水平,LIPUS恢复化疗后骨髓抑制的机制可能是增加了外周血G-CSF的水平,增加骨髓SCF、ICAM-1并降低VCAM-1的mRNA相对表达水平,增加了骨髓抑制大鼠的骨髓有核细胞数。