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目的：观察AKF-PD对心肌梗死大鼠心肌纤维化的预防性治疗作用；并采用新生大鼠心肌成纤维细胞(CFs)的实验,进一步研究AKF-PD是否通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)通路影响转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌成纤维细胞活化以及纤维连接蛋白(fibronectin, FN)表达,以探讨AKF-PD抗心肌纤维化的作用机制。方法：112只雄性SD大鼠随机分为心肌梗死组(n=104)、假手术组(n=8)。冠脉结扎术后将造模成功的大鼠随机分为模型组、AKF-PD高剂量组(500mg/kg/d)、AKF-PD中剂量组(250mg/kg/d)、 AKF-PD低剂量组(125mg/kg/d)、培哚普利组(2mg/kg/d)。药物干预5周后,留取各组大鼠左室心肌组织,称量左室重量,计算左室重量指数(LVWI,左室重量mg/体重g)；并进行Masson、HE染色,并计算非梗死区心肌胶原容积分数(CVF)、血管周围胶原面积与管腔面积的比值(PVCA/VA);采用免疫组织化学法检测各组大鼠非梗死区心肌组织Ⅰ型胶原阳性面积百分比。分离、培养CFs,①用不同浓度TGF-β1(5ng/ml,10ng/ml,15ng/ml)作用24小时,用MTT法检测其增殖；②将细胞分为对照组、TGF-p1组(10ng/ml). AKF-PD组(TGF-β1+2mMAFK-PD),10ng/mlTGF-β1刺激24小时后,用MTT法检测其增殖；③将细胞分为对照组、TGF-β1组(10ng/ml)、 AKF-PD组(TGF-β1+2mM AFK-PD)、PD98059组(TGF-p1+25μM PD98059)、SB203580组(TGF-p1+10μMSB203580)以及c-JunN-末端激酶(JUN) inhibitor Ⅱ组(TGF-β1+10μM JNK inhibitor Ⅱ), TGF-β1(10ng/ml)刺激24小时后,用Western blot法检测各组α-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin, α-SMA)、FN蛋白的表达；④将细胞分为对照组、TGF-β1组(lOng/ml)、AKF-PD组(TGF-β1+2mM AFK-PD)、PD98059组(TGF-β1+25μM PD98059), TGF-β1(lOng/ml)刺激60分钟后,用Western blot方法检测各组ERK1/2、磷酸化ERK1/2(pERK1/2)蛋白的表达。结果：1.与假手术组比较,模型组LVWI明显增加(P<0.05)；与模型组比较,AKF-PD高剂量组、培哚普利组LVWI明显减少(P<0.05)；与培哚普利组比较,AKF-PD各剂量组LVWI均有所增加。2.与假手术组比较,模型组CVF明显增高(P<0.05)；与模型组比较,AKF-PD各剂量组与培哚普利组CVF均降低,无统计学意义。与假手术组比较,模型组的PVCA/VA值均明显增高(P<0.05)；与模型组比较,AKF-PD低剂量组与培哚普利组的PVCA/VA值均明显降低(P<0.05)。3.与假手术组比较,模型组心肌组织Ⅰ型胶原阳性面积百分比均明显增加(P<0.05)；与模型组比较,AKF-PD高剂量组与培哚普利组心肌组织Ⅰ型胶原阳性面积百分比均明显减少(P<0.05)；而与培哚普利组比较,AKF-PD各剂量组心肌组织Ⅰ型胶原阳性面积百分比均稍增加,但无统计学意义。与对照组相比,不同浓度TGF-β1均可显著促进心肌成纤维细胞的增殖(P<0.05)；与对照组相比,TGF-β1组心肌成纤维细胞增殖明显增加(P<0.05)；与TGF-β1组相比,AKF-PD组心肌成纤维细胞增殖明显减低(P<0.05)。与对照组相比,TGF-β1组a-SMA蛋白表达均明显增加(P<0.01)；与TGF-β1组相比,AKF-PD组、PD98059组、SB203580组α-SMA蛋白表达均明显减低(P<0.05),而JNK inhibitor Ⅱ组a-SMA蛋白表达虽然有所减低,但无统计学意义。与对照组相比,TGF-β1组FN蛋白表达明显增加(P<0.05)；与TGF-β1组相比,AKF-PD组FN蛋白表达明显减低了约69%(P<0.05)；此外,PD98059组、JNK inhibitor Ⅱ组FN蛋白表达均明显减低(P<0.05),而SB203580组FN蛋白表达未受到抑制。与对照组相比,TGF-β1组pEPK1/2的蛋白表达明显增加(P<0.001)；与TGF-β1组相比,AKF-PD组及PD98059组pERK1/2的蛋白表达明显减低(P<0.001)。结论：AKF-PD可降低心肌梗死大鼠心肌胶原的沉积,减轻心肌小血管重塑,对心肌梗死后大鼠心肌纤维化有预防性治疗作用,AKF-PD不仅可抑制TGF-β1诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖,还可抑制TGF-β1诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞α-SMA、FN的表达以及ERK1/2的磷酸化,提示AKF-PD可通过ERK信号传导通路抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞-肌成纤维细胞表型转化,从而发挥其抗心肌纤维化的作用。