高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）的研究应用一直在化学分析分离中发挥着重要的技术指导作用,例如在石油业、化工业、医药卫生以及生命科学等科学领域。而有效的色谱研究开发和完善的机制验证不仅可以有效确保实验室资源得到充分利用,还可充分满足各产品在每个阶段的技术开发。高效液相色谱分析方法因具有高压输液泵、高灵敏度以及高选择性能,故已成为一种应用广泛的色谱分析技术。同时,在进行物质分析分离过程中,紫外分析检测器的运用可快速地对多数有机物进行检测分析。其分析原理主要利用待测样品成分与固定相、流动相两相间的相互作用的差异在两相中做相对运动,经过反复多次的吸附-解吸-分配过程来影响色谱柱对样品不同组分的保留时间,最终使得目标物各组分先后流出色谱柱进入检测器达到对样品的检测分析。基于此分析方法,中草药物质的研究是最具代表性的,主要是因为大部分中草药中的黄酮类化合物和有机酸有效成分对人类和动物有重要的生理作用。除此之外,该法可准确快速地确定待测产品的自身身份、纯度以及物理特性。因此,通过除杂、富集、萃取等手段为基础,以创新性胶束萃取-浊点预富集、超声辅助均相离子液体微萃取作为前处理技术,对样品中的黄酮类化合物和有机酸进行快速准确地定性、定量研究在其临床应用方面具有重要的发展意义。同时,环保、便捷、有效的分析分离方法一直是广大研究者努力的方向。而本论文中便充分利用了环保便捷有效的理念以HPLC法对中草药一点红、山楂和醉鱼草系列药物中黄酮类物质和有机酸进行萃取分离和定量检测。具体研究工作如下:1.高效液相色谱法同时测定一点红中8种活性成分的含量建立同时测定和分离一点红药材提取物中原儿茶酸、咖啡酸、牡荆素、卢丁、槲皮苷、槲皮素、木犀草素和芹菜素8种活性成分及其含量测定方法。色谱分析采用超声辅助萃取-高效液相色谱法,将样品用流动相溶解,过滤后取20微升注入HPLC仪,检测器进行分析。最后通过外标法以峰面积计算出结果。实验表明本方法操作简单、快速,具有较好的重现性和稳定性,为药用植物一点红的质量控制提供了实验依据。2.胶束萃取-浊点预富集-高效液相色谱法同时定量山楂中9种酚酸和黄酮类化合物建立以非离子表面活性剂、胶束萃取-浊点预富集与超声波萃取技术结合的高效液相色谱法,同时测定山楂中原儿茶酸、咖啡酸、牡荆素、阿魏酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素、山奈酚和芹菜素9种活性成分有效含量。以非离子表面活性剂聚氧化二乙烯脂肪酸甲醇醚genapolx-080为主要的萃取剂,同时利用氯化钠溶液进行浊点萃取和预富集。考察了非离子表面活性剂浓度、固液体积百分比、电解质浓度、溶液萃取pH值、超声波萃取时间等多种影响因素,来确定最佳参数。将样品和对照品用流动相溶解并进行定容,过滤后取20微升注入高效液相色谱仪,再由检测器进行分析,最后通过外标法以峰面积计算出结果。结果表明,该方式可不仅有效缩短萃取样品前预富集和处理时间,对环境友好,同时也为山楂中黄酮和有机酸的提取提供了新型的、可靠的分析方法。3.超声辅助均相离子液体微萃取-高效液相色谱法测定醉鱼草中5种黄酮类化合物建立超声辅助均相离子液体微萃取-高效液相色谱法（UA-HILME-HPLC）同时分离测定醉鱼草中槲皮素、橙皮素、芦丁、芹菜素、金合欢素5种黄酮类化合物含量。该原理是通过向均相离子提取液中加入水溶性离子形成一种水不溶性均相离子,对其进行离心,发生相分离,得到均相离子液体,最后进行目标物的检测分析。方法主要考察了离子液体浓度、固液体积比、溶液pH值、超声时间、超声功率、超声温度、NH₄PF₆的浓度等影响因素,来进一步优化各种参数。本法集化合物的提取、浓缩、分离和纯化等功能于一体,不仅不需大量使用挥发性的有机溶剂,还具有提取和浓缩的时间短,样品用量少等优点,结果表明该方式可广泛应用于各种药用植物中活性成分的提取和分离分析。