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目的：生物活性肽来源广泛，对人体许多生理功能有许多调节作用，是当前保健食品界研究的热门领域，本课题探讨了健康羊肝肽（HircineLiver Peptide,HLP）对小鼠免疫功能的影响及机制，为今后将健康羊肝肽开发成功能性食品提供理论依据 方法： 1.HLP对小鼠免疫功能影响的测定:将体重为（18±2）g的清洁级昆明种小鼠80只（♀♂各半）适应性饲养5天后，随机分为八组：HLP高剂量组(HHLP)（100mg/kg/次）、中剂量组(MHLP)（50mg/kg/次）、低剂量组(LHLP)（25mg/kg/次）、环磷酰胺（Cyclophosphamide，Cy）免疫抑制组（40mg/kg）、Cy+HHLP、Cy+MHLP、Cy+LHLP组、空白对照(Control,con)组。凡需给cy的实验组小鼠均需提前腹腔按剂量注射cy三次（每日一次），第四天其余小鼠开始按剂量每日灌胃两次，cy隔日按剂量腹腔注射。给药四周后，于处死前24小时每只鼠注射1ml0.5%的淀粉溶液，处死当天前6小时腹腔注射1ml0.05%鸡红细胞，脱颈处死前眼球静脉取血。（1）用药期间观察小鼠一般状态：包括活动度、饮食、毛色、光滑度等；（2）采用流式细胞分析技术测定各试验组小鼠静脉血中NK、Th、Tc淋巴细胞百分数；（3）处死后抽取腹腔冲洗液，进行瑞士染色实验，测定巨噬细胞吞噬功能；（4）摘取脾、胸腺称重进行免疫脏器指数的相关测定，并制备脾细胞悬浮液，测定脾细胞的增殖能力；（5）采用苏木精-伊红染色染色(hematoxylin and eosin stain, H&E stain)，观察各实验组小鼠脾脏组织的形态学变化。 2．HLP对小鼠免疫功能影响的机制的研究：采用实时荧光定量PCR（realtime-PCR)法来检测各组小鼠脾脏中mir-155的表达水平；采用免疫组化法检测各组小鼠脾脏组织中细胞因子信号抑制因子1(Suppressor Of Cytokine Signaling1,SOCS1)的表达。 结果： 1.HLP对小鼠免疫功能的影响：（1）各组小鼠一般状态：随着饲养时间延长，Cy组、Cy+HHLP、Cy+MHLP、Cy+LHLP组小鼠活动度下降、饮食减少、毛色亮度减弱、光滑度减弱；LHLP、MHLP组小鼠无显著变化，HHLP小鼠活跃度增加、饮食增加,毛色亮度、光滑度无显著变化。（2）小鼠体重：与Con组相比，LHLP组、MHLP组、HHLP组无显著差异（P≥0.05），Cy组无显著差异（P≥0.05）；与Cy组相比，LHLP+Cy组、MHLP+Cy组和HHLP+Cy组均无显著差异（P≥0.05）；脾脏指数和胸腺指数：与Con组（脾脏指数0.57±0.07)，LHLP组、MHLP组、HHLP组无显著差异（P≥0.05），Cy组无显著差异（P≥0.05）；与Cy组相比，MHLP+Cy组（1.63±0.06）、HHLP+Cy（2.15±0.08）脏指数脾脏指数显著增加（P＜0.01）；与Con组(胸腺指数0.14±0.06）相比,MHLP组(0.28±0.06)、HHLP组（0.29±0.07）显著增加（P＜0.05），Cy组（0.06±0.03）显著降低（P＜0.05）；与Cy组相比，MHLP+Cy组（0.31±0.06）、HHLP+Cy组（0.93±0.07）胸腺指数显著增加（P＜0.01）；这表明，HLP在一定程度上能使正常小鼠、免疫抑制小鼠的胸腺指数增加，并能使免疫抑制小鼠的脾脏指数增加。（3）淋巴细胞总数：与Con组（8.41±1.27）相比， HHLP组（15.19±3.86）显著增加（P＜0.01），Cy组（2.34±0.78）显著降低（P＜0.01）；与Cy组相比，MHLP+Cy(6.41±2.23)、HHLP+Cy组(12.43±2.46)均显著增加（P＜0.01）；这表明，一定剂量HLP能使正常小鼠和免疫抑制小鼠淋巴细胞总数增加。NK细胞百分数：与Con组（1.02±0.21）相比，HHLP组(6.39±1.60)显著增加（P＜0.01），Cy组(0.34±0.28)有降低趋势，但差异不显著（P≥0.05）；与Cy组相比，LHLP+Cy(1.85±0.73)、MHLP+Cy(6.61±1.92)、HHLP+Cy组（8.68±1.25）均显著增加（P＜0.01）；这表明，HLP在一定程度上能使正常小鼠和免疫抑制小鼠NK细胞百分数增加，且当小鼠处于免疫抑制状态时，作用更强。Tc细胞百分数：与Con组（10.48±1.37）相比，HHLP组(12.81±2.38)显著增加（P＜0.05），Cy组（3.26±1.22）显著降低（P＜0.01）；与Cy组相比， MHLP+Cy(8.36±2.21)、HHLP+Cy组（12.10±2.70）均显著增加（P＜0.01）；这表明， HLP在一定程度上能使正常小鼠和免疫抑制小鼠Tc细胞百分数增加。Th细胞百分数：与Con组（48.52±1.78）相比，HHLP组(63.19±5.65)显著增加（P＜0.01），Cy组（26.86±4.11）显著降低（P＜0.01）；与Cy组相比，LHLP+Cy（32.63±3.04）、MHLP+Cy(43.65±4.03)、HHLP+Cy组（65.76±5.45）均显著增加（P＜0.01），且呈现一定的剂量相关性；这表明，HLP在一定程度上能使正常小鼠和免疫抑制小鼠Th细胞百分数增加。（4）吞噬指数：Con组（0.47±0.03）相比，HHLP组（0.70±0.36）显著增加（P＜0.05）， Cy组（0.29±0.05）显著降低（P＜0.05）；与Cy组相比，HHLP+Cy组（0.50±0.04）显著增加（P＜0.05）。吞噬百分数:与Con组（34.60±2.71）相比，LHLP（47.70±3.59）、MHLP（53.20±3.91）、HHLP组（64.80±4.34）均显著增加（P＜0.01），且作用强度与剂量呈现一定的相关性，Cy组（13.60±4.86）显著降低（P＜0.01）；与Cy组相比，LHLP+Cy（24.60±4.77）、MHLP+Cy（32.90±6.15）、HHLP+Cy组（45.80±4.54）吞噬百分数均显著增加（P＜0.01）,且增加幅度与剂量呈相关性。这表明，HLP能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠巨噬细胞吞噬能力。（5）增殖率:与Con组（0.1513±0.0505）相比，HHLP组（0.5909±0.1553）显著增加（P＜0.05），Cy组（0.0593±0.0114）显著降低（P＜0.05）；与Cy组相比，LHLP+Cy组（0.5103±0.0259）、MHLP+Cy组（0.5955±0.0720）、HHLP+Cy组（0.6369±0.0479）均显著增加（P＜0.01），且增加幅度与剂量呈相关性；刺激指数:与Con组（1.1525±0.0544）相比，HHLP组（1.8909±0.2498）显著增加（P＜0.05），Cy组（1.1604±0.0117）无显著差异（P≥0.05）；与Cy组相比，MHLP+Cy组（2.0501±0.0892）、HHLP+Cy组（2.3980±0.1859）均显著增加（P＜0.05）；这表明， HLP能增强正常小鼠和免疫抑制小鼠脾淋巴细胞增殖能力。（6)组织形态学检测：与Con组比较，Cy组、LHLP+Cy组、MHLP+Cy组、HHLP+Cy组小鼠脾组织均发生不同程度的异常（淋巴细胞排列较稀疏，且结构模糊且呈不规整排列，淋巴细胞数量减少，红髓区小静脉充血，脾窦轻度扩张，淋巴滤泡，可见坏死细胞），Cy组最为明显。这说明HLP能够有效保护免疫抑制剂环磷酰胺所引起的脾组织损伤。 2.HLP对小鼠免疫功能影响的机制的研究：（1）mir-155的相对表达情况：与Con组（1.149±0.221）相比，HHLP组(1.953±0.263)显著上调（P＜0.05），Cy组（0.271±0.129）显著下调（P＜0.01）；与Cy组相比，MHLP+Cy(0.921±0.214)、HHLP+Cy组（0.948±0.119）均显著上调（P＜0.05）；这表明，HLP在一定程度上能使正常小鼠和免疫抑制小鼠脾脏中mir-155的表达上调。（2）SOCS1蛋白表达情况（脾脏组织SOCS1免疫组化评分结果）：与Con组（1.8±0.42）相比，MHLP组(1.3±0.483)显著下调（P＜0.05），Cy组（2.6±0.52）显著上调（P＜0.05）；与Cy组相比， HHLP+Cy组（2.2±0.42）显著下调（P＜0.05）；这表明，HLP在一定程度上能使正常小鼠和免疫抑制小鼠脾脏中SOCS1的表达下调。 结论：（1）来源于健康羊肝脏的生物活性肽在一定程度上能够提高健康小鼠及免疫抑制小鼠的免疫功能；（2）来源于健康羊肝脏的生物活性肽能使健康小鼠及免疫抑制小鼠脾脏mir-155基因表达上调，SOCS1表达下调。