本研究采用本课题组分离鉴定的猪圆环病毒分离株PCV2_WHN,设计一对引物,用PCR扩增出PCV2的ORF2基因,并克隆到pUCm-T载体上,测序得ORF2基因全长705bp,编码234个氨基酸。 用KpnI和BamHI双酶切的方法处理pUCm-PCV-ORF2和真核表达载体pcDNA3.1（+）,进行连接反应,转化大肠杆菌JM109,酶切和PCR鉴定结果表明,成功构建了真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2。用碱裂解法提取并纯化真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2。 用真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2免疫小鼠（第一次免疫后两周进行第二次免疫）,用间接ELISA方法检测免疫抗体的结果表明,第一次免疫后一周产生抗体,二免后,小鼠的抗体水平迅速上升,在第4周达到高峰,其后缓慢下降,可持续11周以上。 用PCR检测了pcDNA-PCV-ORF2的机体组织器官中的动态分布。结果表明,首免后3h到28d小鼠的各种组织器官中均能扩增出目的基因片段。在第44d脑组织PCR结果为阴性,第58d能从血液、心脏及肌肉组织扩增出目的基因片段,基因片段在肌肉中的存留时间达到88天以上。 提取小鼠各组织样品染色体基因组DNA进行PCR检测研究表明,纯化的染色体基因组未扩增出条带,pcDNA-PCV-ORF2未整合到小鼠染色体上,证实了用真核表达质粒pcDNA-PCV-ORF2免疫的安全性。 本研究为进一步研究猪圆环病毒核酸疫苗提供了科学依据。