论文部分内容阅读
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是珍贵的药用植物,与一些药食同源性中药一起使用,制成复方制剂,更能发挥铁皮石斛的功能。本课题采用铁皮石斛及几种药食同源植物制备成铁皮石斛复方制剂。通过对C57BL/6哮喘模型小鼠灌胃铁皮石斛复方制剂探讨其对模型小鼠肺功能,免疫功能及肠道菌群的影响,并用甘草粉作为阳性对照。结果如下:1、铁皮石斛复方制剂对哮喘小鼠肺功能的影响:卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)诱导的哮喘小鼠在灌胃35天铁皮石斛复方制剂后得到改善。哮喘模型小鼠与铁皮石斛复方制剂灌胃小鼠相比,体质量无显著差异。模型组小鼠与正常组小鼠相比,免疫器官胸腺和脾脏质量及脏器比降低(p<0.001),而铁皮石斛复方制剂灌胃组免疫器官质量及脏器比相比于模型组则有所升高,但是差异没有统计学意义;从铁皮石斛复方制剂对小鼠肺泡灌洗液(Bronebial alveolar lavage fluld,BALF)中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)的影响中分析,铁皮石斛复方制剂能够提高哮喘小鼠SOD、CAT、T-AOC水平,且对比发现,SOD和T-AOC水平中剂量组提高最明显,与模型组相比SOD、T-AOC分别提高68.34%、101.08%,而CAT活性提高则是高剂量组最优,提高了58.64%,说明铁皮石斛复方制剂可以提高小鼠肺组织的抗氧化能力,维持氧自由基生成与清除的动态平衡;对小鼠肺泡灌洗液炎性细胞分类与计数以及观察小鼠肺组织病理切片发现,灌胃组中剂量效果最为明显,中剂量组细胞总数、嗜酸性粒细胞数、淋巴细胞及中性粒细胞数与模型组相比分别下降43%、68.49%、51.75%、60.00%,同时铁皮石斛复方制剂灌胃中、高剂量组小鼠肺组织炎性细胞浸润减轻,上皮细胞坏死脱落现象减轻,支气管管腔完整,说明铁皮石斛复方制剂能够改善哮喘小鼠气管炎症,改善小鼠肺功能。2、铁皮石斛复方制剂对哮喘小鼠免疫功能的影响:铁皮石斛复方制剂灌胃组小鼠血清SOD、CAT、T-AOC水平均提高,且与模型组相比,中剂量组SOD和CAT活性升高显著(p<0.01),分别为84.46%、61.29%,T-AOC活性升高极其显著(p<0.001),为111.79%;免疫细胞因子的基因表达量分析结果显示,铁皮石斛复方制剂灌胃组中剂量效果最好,IL-5、NF-κB、转录因子GATA-3和RORγt的表达量与模型组比分别下调64.06%、65.95%、58.43%、25.65%,IFN-γ和转录因子T-bet的表达量则分别上调173.07%、18.75%。结果证明铁皮石斛复方制剂能够通过提高哮喘小鼠血清抗氧化能力,参与Th1、Th2、Th17以及NF-κB的代谢途径改善小鼠气管炎症,从而提高小鼠的免疫力。3、铁皮石斛复方制剂对哮喘小鼠肠道菌群的影响:对各组小鼠的肠道内容物提取总DNA,进行测序分析,从而把6组小鼠肠道菌群进行比对,结果显示:哮喘小鼠和灌胃组以及正常组肠道菌群均有差异,其中比较明显的有乳酸杆菌属(Lactobacillus)、艾克曼氏菌属(Akkermansia)、苏黎世杆菌属(Turicibacter)、理研菌属(Rikenella)和柔嫩梭菌属(Faecalibaculum),哮喘组小鼠乳酸杆菌属(Lactobacillus)高于正常组17.29%,而艾克曼氏菌属(Akkermansia)和苏黎世杆菌属(Turicibacter)低于正常组3.36%、0.72%,灌胃组肠道菌群多样性与剂量有着明显关系,低剂量组肠道菌群群落最接近正常组,与正常组相比,苏黎世杆菌属(Turicibacter)和艾克曼氏菌属(Akkermansia)比例分别增加10.35%、6.09%。聚类分析发现模型组与正常组聚为一类,可能是因为模型组后期恢复期比较长。以上结果说明,铁皮石斛复方制剂能够调节小鼠肠道菌群,而且它的作用可能超过了哮喘对肠道菌群的影响。