微波辅助低共熔溶剂提取川芎中阿魏酸及其体外活性研究

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川芎是我国传统大宗常用药材,对于心血管及妇科方面的疾病治疗效果显著。阿魏酸是酚酸类活性成分的代表物质,其含量的高低是川芎药材质量评价的标准,具有抗氧化、抗高血脂、抗癌、预防心血管疾病等多种生物活性。目前市场对于这种安全的药用成分的需求量逐年增加,而工业上应用的传统提取分离方法又存在提取效率不高、溶剂毒性较大、操作复杂、对环境危害大等问题,因此研究安全、高效地提取纯化川芎中的酚酸类成分阿魏酸的方法对川芎药材的有效利用和药材在新药开发、保健品、食品和化妆品工业方面的应用具有重要意义。本文以川芎为研究材料,采用微波辅助低共熔溶剂的方法对川芎中的阿魏酸进行提取,并对其提取纯化工艺进行了优化。除此之外,还对比研究了纯化前后样品的抗氧化、抑菌活性,为川芎中酚酸类成分阿魏酸的提取及分离纯化新方法的研究提供一种新思路。主要研究结果如下:1.以川芎阿魏酸的提取率为指标,采用微波辅助低共熔溶剂提取川芎中的阿魏酸,并对其提取工艺进行了优化。确定了最佳提取工艺为:以摩尔比1:2的氯化胆碱/1,2-丙二醇组成、含30%水的低共熔溶剂作为最佳提取溶剂,提取时间20 min,提取温度68℃,液固比30:1 mL/g。得到提取率的实验值为2.32 mg/g,在预测值2.39mg/g的95%置信区间内,表明拟合的模型合理、可靠,能够较好的预测试验提取率。2.用NKA-9型大孔树脂对低共熔溶剂提取液中的阿魏酸进行富集纯化。得到最佳富集纯化工艺为:上样液为稀释2倍的提取液,上样量220 mL,上样后用水洗去未吸附的目标成分、部分水溶性较好的杂质和树脂吸附的低共熔溶剂,再用240mL 50%的乙醇以1.0 mL/min的流速进行洗脱。在此工艺条件下,阿魏酸的回收率为86.95%,其中阿魏酸的含量为7.03%。3.对比研究了纯化前后样品的体外抗氧化和抑菌活性,结果显示:纯化前后的样品均表现出了良好的抗氧化能力,且效果呈现明显的剂量相关性。研究纯化前后样品清除DPPH、ABTS和羟基自由基的能力发现,纯化后样品的IC50值比纯化前分别降低了1.62μg/mL、1.46μg/mL和9.81μg/mL,而最大清除率分别提高了6%、1%和26%。同时还发现,纯化前后的样品对ABTS自由基的清除效果显著高于Vc样品,而对DPPH自由基和羟基自由基的清除效果能够达到与Vc相当或是略小的程度。此外,分析纯化前后样品抑制3种菌生长的作用效果发现,不同菌的抑制效果呈现差异性,其抑制效果的顺序为:金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>枯草芽孢杆菌。同时还发现在样品质量浓度相同的条件下,纯化后的样品的抑菌效果强于纯化前的,说明大孔树脂纯化有利于川芎阿魏酸抑菌活性的提高。
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