视黄醇结合蛋白(RBP)是在肝脏中合成的一类运载视黄醇的小分子结合蛋白,临床研究表明,RBP在监测肝脏、肾脏功能及机体营养状况中有着十分重要的作用。近年来,免疫比浊法因其操作简单、稳定性好等优点,被广泛应用于临床自动化检测中。但是,由于免疫比浊法测低值时存在误差,在检测应用过程中会有假阴和假阳现象的发生,使其应用受到限制。所以本研究在比浊法的基础上建立了胶乳增强免疫比浊法,有效的提高了试剂的灵敏度和线性范围。本研究在共价偶联法的基础上制备了RBP免疫胶乳,并对影响偶联反应效率的各条件进行分析,结果表明：在活化剂为EDC/NHS、活化时间为30min、胶乳：抗体蛋白比例为10：2、聚苯乙烯微球粒径为100nm、反应体系为pH6.1的MES缓冲液、反应时间为2h的条件下、PEG6000浓度为2%时,胶乳微球抗体蛋白偶联率最大,所制备的试剂定标曲线吸光度值、线性、灵敏度也较好。利用扫描电镜、动态光散射对免疫胶乳的稳定性进行了深入的研究,电镜和动态光散射分析结果都显示,RBP蛋白与聚苯乙烯微球发生偶联反应后胶乳的颗粒均一、分散性好、稳定性高。依据临床检验的要求对自制的检测试剂性能进行评价。结果为：自制试剂的准确度为1.07%、批内CV为2.89%、批间CV为3.45%,均<10%,线性范围为1.0-150mg／L,此浓度范围完全满足临床标本RBP蛋白的参考值范围(正常值为25-70mg／L)的检测要求,可见自制试剂能满足临床自动化检验对RBP蛋白检测的要求。