视网膜下液中ICAM-1含量与增殖性玻璃体视网膜病变关系的研究

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前言 增殖性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是导致视网膜脱离手术失败的主要原因。近年来,对PVR的发病进行了大量的研究,这其中,细胞与细胞以及细胞与细胞外基质之间的粘附作用是分子生物学领域中一个基本且重要的问题。 形态学和免疫组化研究显示广泛的视网膜增殖膜形成起因于各种细胞的迁移和增殖,包括视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞、成纤维细胞、神经胶质细胞和巨噬细胞。由于视网膜色素上皮细胞只有实现粘附后才能完成激活、迁移、增生等过程,因此,RPE细胞在异位的粘附是PVR形成中最重要的环节,细胞粘附是细胞移行和增殖的前提。 目前,手术仍然是治疗PVR的主要手段。但手术并不能有效阻止细胞的迁移增生,甚至刺激其加重,导致PVR复发,所以,最好的方法是预防。细胞间粘附分子-1(Intercellular adhension molecule-1,ICAM-1)对细胞趋化游走起重要作用,而细胞趋化游走发生于PVR的早期阶段,如能在此阶段阻断它的活化,将会延缓PVR的进程,甚至防止其发生。通过对可溶性细胞粘附分子在PVR发生中作用的研究,可以使我们对PVR的免疫机制有更进一步的了解,为将来免疫干预的辅助治疗做准备。本文通过选择视网膜脱离伴不同PVR分级的患者,定量检测其视网膜下液(subretinal fluid,SRF)中ICAM-1的含量,同时以正常人玻璃体做对照,探讨ICAM-1在PVR发病中的作用,为今后更有效地防治PVR提供理论依据。 材料和方法 一、病例来源 选择39例诊断为了源性视网膜脱离(rhe驯atogenous rehnddetachment,RRD)合并PVR的住院患者,根据PVR的国际分级标准将患者分为A人人山四级,本研究的 B人力组与PVR的B。C山级相对应(本研究PVR-D级患者均为D;级/组病例较少,未列人实验人 二、标本采集 1.对照组正常玻璃体,共8例,来源于离体8小时之内,湿房保存的角膜移植取材后的正常成年人尸体眼球。 2.病例组视网膜下液,采集于经外路手术的视网膜脱离患者,术中冷凝后穿刺放液,抽取视网膜下液约0.5 ml,注人无菌试管中,被血液污染样品未列人本实验,所有标本均置一70℃冻存。 5、ICAM一的检测 采用上海森雄科技有限公司提供的SICAM-1定量EIA试剂盒。将标准品倍比稀释8个浓度,并设空白对照,正常人玻璃体做实验对照,在490urn测出标准品及待测标本的吸光度值,绘出标准曲线,求出标本的 ICAM一二含量。 四、统计学分析病例组与对照组以及病例组间的比较采用方差分析,不同病程的组间比较用t’检验。 结 果 不同PVR分级患者视网膜下液中ICAM-l的平均浓度分别为 B组 7.484ngilnl人组 16.383ng/Inl对组 28.466n少血,对照组平均浓度为0.515n吵d,经比较均有显著性差异u<队05人随着P*R分级的加重,视网膜下液中IC*M-1的浓度增高(P<O.05人不同病程的组间比较,大于一个月的病例组与小于一个月 ·2·的病例组的平均浓度分别为30.267n矿M和8.452n吵Inl,经统计学分析,差异非常显著河<O.005人 讨 论 PVR的形成是眼内对损伤的一种炎症及修复反应,包括炎症期、增生期和癫痕期。在PVR炎症修复中需通过细胞粘附分子介导的细胞直接接触而实现。ICAM一二是最重要的粘附分子之一,是免疫球蛋白超家族的一个成员。异常升高的ICAM-l可以促进细胞外基质对视网膜色素上皮细胞、成纤维细胞、淋巴细胞等的分化、迁移、增生,并启动免疫反应及炎症愈合过程,导致纤维化。异常增生等病理变化。本研究结果显示,ICAM司在各级PVR患者的SRF中的浓度都明显高于对照组,且其含量随着PVR的加重而升高,部眼内ICAM一二含量多少主要取决于局部血一视网膜屏障在RD后的破坏程度以及血一视网膜屏障处细胞因子介导反应的程度。同时,我们也发现,随着病程的延长,SRF中ICAM一二的浓度也随之升高,这主要因为ICAM一互的升高会促进淋巴细胞和局部炎症细胞的不断补充和积聚,而ICAM-1在局部的清除率很低。纤维膜性增生是PVR的主要特征,而RPE细胞是形成PVR增殖膜的主要细胞,在PVR”的形成中起着重要作用。由于yE细胞只有实现粘附后才能完成激活、迁移、 生等过程,因此,RPE细胞在异位的粘附是PVR形成中最重要的环节。实验表明,粘附分子的单克隆抗体可阻止细胞介导的病理膜的收缩。由此可见,细胞粘附是细胞移行和增殖的前提,于扰粘附分子介导的细胞与细胞外基质的粘附,可以减弱增生性病变的程度。 目前,对PVR的治疗仅限于手术,但手术并不能有效阻止细胞的迁移增生,甚至可能刺激其加重,导致PVR复发。而且,过度的炎症反应有可能使一个成功的网膜手术毁于一旦,因此,采用局部或全身抗炎以及抗粘附分子抗体作为治疗PVR的辅助手段,将 ·3·为PVR开拓新的治
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