猪苓为多孔菌科真菌猪苓[Polyporus umbellatus(Pers.)Fries]的干燥菌核,有利水、渗湿的功效,在中医临床上主要用于治疗水肿、尿少、带下、黄疸、腹泻等症。近年来,由于生活节奏加快,环境污染、工作压力、长期服用糖皮质激素和化疗药物等使越来越多的人免疫力下降,感染疾病的风险增加,而猪苓中所含的多糖类成分在免疫调节方面有明显的作用。猪苓多糖(Polyporuspolysaccharide,PPS)是从猪苓中提取的水溶性多糖,具有抗肿瘤、免疫调节、肝保护、延缓衰老等多种药理活性,并且对恶性肿瘤、慢性乙型肝炎具有较好的治疗作用。大量研究表明PPS具有调节免疫及体外抗氧化的作用,但是有关其增强免疫功能及体内抗氧化的研究还不全面。因此本实验采用水提醇沉法对PPS进行提取纯化,通过环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy)建立免疫抑制模型,研究PPS对免疫抑制小鼠免疫器官、免疫细胞、免疫因子及抗氧化作用的影响,为进一步开发利用PPS提供依据。主要的研究内容及结果如下:1.采用水提醇沉法提取猪苓粗多糖,苯酚-浓硫酸法测定粗多糖中PPS含量。结果显示粗多糖得率为2.34%;粗多糖中糖的含量为68.10%。2.采用Cy建立免疫抑制模型研究PPS的免疫增强作用:将72只Balb/c小鼠随机分为正常组、Cy模型组、阳性组和3个不同剂量PPS组(低、中、高剂量分别为50、100、200 mg/kg),每组12只。第1～3 d以80 mg/kg剂量腹腔注射0.2 mL环磷酰胺溶液建立模型(正常组除外)。此后,正常组和Cy模型组灌胃0.3 mL/d生理盐水,阳性组给予20 mg/kg的盐酸左旋咪唑,同时3个PPS组分别以相同的剂量连续灌胃14d。第14d,除正常组外,其他5组均再一次腹腔注射环磷酰胺溶液,24h后,小鼠称重,眼眶采血后处死,解剖取样,测定各组小鼠指标。结果表明:腹腔注射Cy后,各组小鼠的体重均明显下降。由免疫器官指数可知,PPS能够提高小鼠胸腺指数和脾脏指数,但对肝脏指数影响不大。此外,200 mg/kgPPS可明显增加小鼠血清蛋白含量及外周血细胞数目(P<0.05)。同时,PPS提高了脾淋巴细胞增殖能力及巨噬细胞吞噬活力,促进了巨噬细胞分泌NO、TNF-α和IL-lβ的能力。表明200 mg/kgPPS可明显恢复Cy导致的免疫损伤小鼠的免疫功能,调节免疫系统的免疫应答。3.测定小鼠肝组织匀浆中SOD、MDA、T-AOC、CAT、GSH-Px等氧化应激指标。结果显示:Cy能显著降低正常小鼠肝组织中SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活力,增加MDA含量(P<0.01)。PPS可不同程度的提高肝组织中SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活力,降低MDA含量(P<0.05)。提示PPS能显著减轻机体的氧化应激损伤,提高免疫抑制小鼠的抗氧化能力。从以上实验结果可知,PPS可通过促进Cy诱导的免疫抑制小鼠的免疫应答及抗氧化能力来增强机体免疫力。