影响益生菌存活率因素的研究

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益生菌的保健功效己被世界公认,而且还在不断地发现和研究其新的保健功能。益生菌产品中益生菌活菌数的高低是衡量产品质量优劣的最重要指标。而保持此类产品中较高的活菌数是目前尚需攻克的关键技术难题。对储运、食用方便的益生菌干粉产品来说,难度更大。本课题分别以益生菌中的嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为代表菌种,通过研究嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌干粉产品在干制工艺的各个环节中影响其菌存活性的因素,即增菌培养条件、离心、收集、悬浮条件、喷雾干燥等条件的分析研究,实现采用喷雾干燥法制备具有较高活菌数的益生菌干粉产品。通过实验研究,得出以下结论。 首先研究了中药药液对嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌生长的影响。结果表明:木贼、小茴香、蒺藜、槐花、桑叶和小蓟药液适合嗜酸乳杆菌的生长,当培养24h时,活菌数可以达到10<9>cfu/mL(对照为5.47×10<8>cfu.mL)。桑叶和小茴香药液适合保加利亚乳杆菌的生长,培养24h时活菌数可以达到10<8>cfu/mL以上(对照为5.70×10<8>cfu/mL)。小茴香和莲子药液适合嗜热链球菌的生长,培养24h时活菌数可以达到10<8>cfu/mL以上(对照为5.65×10<8>cfu/mL)。 挑选对三种菌都有较大增菌作用,对菌体形态影响小的小茴香药液作为增菌培养基。通过嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在小茴香药液中生长曲线的研究,确定菌体收集的培养时间分别为18h、16h和20h。通过试验选出菌体收集的条件为:离心转速6000r/min、离心时间10min、离心温度4℃、洗涤液为生理盐水。在该条件下菌体细胞喟浓缩乳悬浮后,嗜酸乳杆菌的活菌数为5.62×10<9>cfu/mL、保加利亚乳杆菌的活菌数为1.60×10<8>cfu/mL、嗜热链球菌的活菌数为1.17×10<9>cfu/mL。嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的存活率分别为64.3%、60.4%和51.3%。 将上述菌体悬浮液以进风温度200℃、出口温度70-80℃、进料速度100mL/min的喷雾干燥条件进行喷雾干燥,所制得的嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌干粉产品的活菌数分别为7.92×10<8>cfu/g、5.85×10<6>cfu/g和1.40×10<6>cfu/g。将此干粉产品作贮藏性试验,结果为:在4℃下放置130d后,嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的活菌数分别为:1.05x10<8>cfu/g、1.21×10<6>cfu/g和1.62×10<5>cfu/g。 此外,对嗜酸乳杆菌快速选择性计数方面进行了初步研究。结果表明:选择MTT或。TTC在计数培养基中的最终浓度为0.1mg/mL。在添加有TTC0.1mg/mL的MRS的培养基上培养36h-48h,就能有效地区分菌落形态,进行菌落计数。
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