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目的 筛选出白及诱导HL60细胞凋亡的有效部位,初步研究白及有效部位诱导HL60细胞凋亡的作用机制,为白及抗白血病奠定实验基础。方法①用95%乙醇以及蒸馏水回流提取白及块茎,用CCK-8研究这两种提取物对HL60细胞的增殖抑制作用;②采用系统溶剂萃取法将白及95%乙醇浸膏分为石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层,用CCK-8检测各部位对HL60细胞的增殖抑制作用;③应用AO/PI染色,光镜下观察醇提物各部位作用细胞24h后,细胞凋亡的形态学变化,结合CCK-8检测结果筛选出白及诱导HL60细胞凋亡的有效部位;④应用Hoechst33342染色和透射电子显微镜观察白及有效部位作用细胞24h后,细胞凋亡的形态学变化;⑤应用流式细胞术分析白及有效部位对细胞凋亡的影响;⑥应用RT-PCR检测白及有效部位作用24h后,HL60细胞内bcl-2和Bax mRNA的表达变化。结果①白及块茎醇提物能有效抑制HL60细胞增殖,IC50为150.01 μg/mL,水提物则无效;②白及块茎醇提物石油醚层、氯仿层和乙酸乙酯层均能抑制HL60细胞增殖,IC50分别为103.91 μg/mL、57.91 μg/mL、101.80 μg/mL,白及氯仿层效果最明显,正丁醇层和水层效果不佳;③白及石油醚层、氯仿层、乙酸乙酯层作用24h后,AO/PI染色后荧光显微镜下可见细胞发生典型的凋亡形态学改变,氯仿层最明显,而白及正丁醇层和水层则无此现象,跟CCK-8检测结果一致,说明氯仿层是白及诱导HL60细胞凋亡的有效部位;④白及氯仿层对HL60细胞作用24h后,Hoechst33342染色荧光显微镜下可见明显的细胞凋亡形态改变,透射电子显微镜下可见典型的凋亡细胞;⑤流式细胞仪分析结果显示,白及氯仿层(50、100、150μg/mL)可有效诱导HL60细胞凋亡,凋亡率分别为24.9%,36.0%,51.3%,呈浓度依赖性;⑥RT-PCR结果显示,白及氯仿层作用24 h后,HL60细胞内bcl-2 mRNA的表达随着药物浓度增加而逐渐减少,Bax mRNA表达增加。结论 白及具有较好的诱导HL60细胞凋亡作用,其中白及氯仿层效果最好,其诱导凋亡机制可能与Bax基因表达增加及bcl-2基因表达减少有关。