选题依据:酸枣仁来源于药用植物酸枣,是治疗失眠的常用中药。在传统活性筛选模式“提取分离-成分鉴定-活性筛选”下,已经阐明酸枣仁治疗失眠的部分效应成分。但这种以植物化学分离为主导的研究模式忽略了中药的复杂性与机体的整体性,割裂了化学成分在体内的相互关联,难以从整体上揭示其效应成分的全貌。因此,需从体外、体内全面认识酸枣仁中发挥作用的效应成分,并结合网络药理学,从成分-效应的角度阐释其潜在效应成分群,为其质量控制提供科学依据。目的:本论文选择临床上治疗失眠的首选中药酸枣仁作为研究对象,以药效学为指导,从化学成分-体内成分-潜在效应成分思路出发,探讨酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。方法:采用1H-NMR代谢组学技术研究酸枣仁干预PCPA致失眠大鼠血清中潜在生物标志物,评价其有效性;建立RSLC Q-Extractive轨道离子阱高分辨质谱分析技术,鉴定酸枣仁水提物中化学成分;通过体内-体外物质组关联,采用已建立的分析方法对大鼠灌服酸枣仁水提物后血清中代谢产物进行研究;将入血成分与失眠蛋白网络进行映射,构建“入血成分-失眠蛋白网络”,遴选潜在效应成分。结果:1.采用1H-NMR代谢组学技术研究失眠大鼠血清生物标志物,找到16个与失眠显著相关的生物标志物,包括8个氨基酸(甘氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸和谷氨酸等)、肉毒碱、谷氨酰胺、琥珀酸、肌酸、胆碱、甜菜碱、丙三醇和葡萄糖。地西泮组对其中7个失眠生物标志物具有回调作用;酸枣仁水提物低剂量组对其中5个生物标志物具有回调作用;酸枣仁水提物中剂量和高剂量组对13个生物标志物具有回调作用。2.在酸枣仁水提物中鉴别和推断了25个化学成分,其中包括12个黄酮化合物,8个三萜皂苷,2个脂肪酸类和3个生物碱。通过体内外物质关联分析,在血清中鉴定出15种化学成分,其中包括6个黄酮及1个代谢物,5个三萜皂苷和2个生物碱及1个代谢物。3.采用Cytoscape软件构建失眠蛋白-蛋白相互作用网络,找到失眠疾病相关靶点143个,主要为5-羟色胺类受体、γ-氨基丁酸类受体、肾上腺素类受体、多巴胺类受体和谷氨酸类受体;入血成分-失眠蛋白网络中初步遴选了5个潜在效应成分,分别是酸李碱、乌药碱、芹菜素、斯皮诺素和酸枣仁皂苷A。结论:本论文采用分析化学、药理学和信息学等多学科理论与技术,实现了体内与体外相结合,物质与效应相结合的研究模式,探讨酸枣仁治疗失眠的潜在效应成分。首先复制大鼠失眠模型,从代谢组学的角度研究了酸枣仁水提物治疗失眠的有效性,其次明确了酸枣仁的化学成分类别,并通过体内外化学成分的关联,初步确定了入血成分的种类和数量;最后将入血成分映射到失眠蛋白网络,遴选出5个潜在效应物质。本研究初步明确了酸枣仁治疗失眠的5个潜在效应成分,为酸枣仁药用资源及含有酸枣仁中药复方制剂的质量评价提供了科学依据。