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目的:本课题以高分化子宫内膜癌Ishikawa细胞株为研究对象,通过对孕酮(MPA)作用后子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖、凋亡的检测以及TGF-β1及其受体的表达情况的测定,观察MPA对人子宫内膜高分化腺癌细胞株Ishikawa细胞中TGF-β1、TβR1蛋白表达的影响,探讨孕酮作用与Ishikawa细胞TGF-β1、TβR1蛋白表达及细胞凋亡之间的关系,为孕激素治疗子宫内膜癌的效应途径提供一定理论依据,并且为子宫内膜癌的孕激素治疗提供新的思路。
方法:常规方法体外培养人子宫内膜高分化腺癌细胞株Ishikawa细胞,细胞随机分组,实验组分别以含不同浓度MPA(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml)的培养液进行处理,对照组加入不含MPA的培养液,MTT法观察Ishikawa细胞在MPA作用不同时间梯度(24h、48h及72h)及浓度梯度(2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml)下的增殖情况;流式细胞仪(FCM)检测Ishikawa,细胞在MPA作用72h后不同浓度梯度(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)下的凋亡率;链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法测定Ishikawa细胞在MPA作用72h后不同浓度梯度(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)下细胞中TGF-β1、TβR1蛋白的表达。
结果:MPA呈时间及剂量依赖性抑制Ishikawa细胞增殖(P<0.05);与对照组相比,MPA处理组细胞凋亡率上升(P<0.01);TGF-β1在Ishikawa细胞中有强表达,MPA作用72h后,其表达明显减弱(P<0.01),TβR1蛋白在Ishikawa细胞中有弱表达,MPA作用72h后,TβR1蛋白在Ishikawa细胞中的表达明显增强(P<0.01)。
结论:孕激素可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖促进其凋亡,并降低细胞中TGF-β1的表达,增强TβR1蛋白的表达。