论文部分内容阅读
骡鸡是乌骨鸡((?))与珍珠鸡((?))通过人工授精产生的杂交体,是一个远缘杂交体,成年骡鸡的性腺发育不完全,从外形上难以区分雌雄性别。本文根据已知禽类CHD基因序列设计了3条引物,采用特异性PCR扩增CHD基因片段,结果表明,这三条引物对已知性别的成年珍珠鸡和乌骨鸡检测结果正确;对珍珠鸡和乌骨鸡的鸡胚性别进行了相应的检测,检测结果与剖检结果相符,证明本文建立的特异性PCR方法可以用于成年鸡和鸡胚的性别鉴定。在此基础上,用此方法鉴定骡鸡及其鸡胚的性别,检测结果表明骡鸡雌雄性别比例均衡,这与雄性骡鸡占较大比例的报道不一致。通过对成年骡鸡的解剖和组织学分析,发现大部分骡鸡的腹腔内同时存在着卵巢和睾丸,为雌雄兼合体。且其卵巢和睾丸都没发育成熟,重量与其亲本的性腺相差较大,睾丸中没有成熟的精子,卵巢中也没成熟的卵母细胞,性腺发育的不成熟是骡鸡不能繁殖的根本原因。与哺乳动物不同,鸟类的性染色体组成是ZZ:ZW,目前其性别决定机制还不完全清楚。是否是Z染色体的剂量效应在鸡的性别决定中起主要作用现在还待解结。鸡DMRT1基因定位在Z染色体上且与W染色体不同源,Dmrt1在胚胎雄性性腺的表达要远远超过雌性性腺,被认为是鸡最重要的雄性决定候选基因。论文选取五个鸟类的性别决定候选因子Dmrt1、Sox9、Asw、Fet1和芳香化酶,以骡鸡为实验材料通过RT-PCR检测这五个因子在性别分化的关键时期(E4.5d-E12.5d)的表达量,比较骡鸡与其亲本之间的表达差异,结果为ZZ/ZW骡鸡的Dmrt1表达量介于父、母本之间,说明Dmrt1表达的上调与骡鸡睾丸的形成有关,而Dmrt1表达的下降与骡鸡卵巢的形成相关；Sox9在ZZ/ZW骡鸡及其父本的睾丸中表达,但骡鸡中的表达时间有所推迟；另外Asw和Fet1在E4.5检测到转录本,芳香化酶出现时间比较迟,Asw在ZW骡鸡和母本卵巢中特异表达,但ZW骡鸡的卵巢发育是不完全的；本文中Fet1的研究结果与已知不同,Fet1并非在雌性中特异表达,在家鸡和ZZ骡鸡的睾丸中都检测到Fet1的转录本。这些结果表明在鸡性别决定中Dmrt1表达量上调与Z染色体的数量无关；在性别决定的关键时期,ZW基因型个体中Dmrt1表达量的下调促使卵巢发育,ZZ基因型个体Dmrt1表达的急剧增加和Sox9的共同作用使睾丸分化；Fet1、Asw和芳香化酶可能影响卵巢的发育或维持卵巢的形态,但它们不是鸡性别决定的主要因子。