凤仙透骨草总黄酮的分离纯化及抑菌作用研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hynyjhnyjn66656
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凤仙透骨草(Impatiens balsamina L.)为凤仙花科(Balsaminaeeae)凤仙花属(Impatiens L.)植物凤仙花的干燥茎。其药用资源丰富,中国南北各地均有栽培。该植物的药用价值早为民间所认知,外擦或捣烂敷于患处用于治疗由真菌感染所致的灰指甲、鹅掌风。临床上用于治疗风湿病、甲沟炎、关节疼痛等疾病。本实验针对凤仙透骨草中黄酮类成分抗真菌效果进行初步研究,旨在进一步将其开发成为抗真菌类药物提供一定的理论依据。本研究采用星点设计-效应面试验设计方法,以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,凤仙透骨草总黄酮提取率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用效应面法优选工艺条件,确定最佳工艺条件是:23倍量80%的乙醇,提取3次,164min/次,提取预测值与真实值偏差为-1.08%。实验提高了总黄酮提取率,建立的数学模型具有良好的预测性,工艺条件简便、重复性较好。为了进一步去除杂质,实验选用大孔树脂为材料对凤仙透骨草总黄酮进行富集与纯化,以总黄酮吸附量和回收率为指标对大孔树脂种类和型号进行筛选及工艺优化,研究结果表明:D101大孔树脂纯化效果较好,其最佳工艺为:上样量9.41 5mg/ml树脂,上样液浓度1.387mg/ml(相当于8.55mg生药/ml),上样流速5BV/h(1BV为30ml),洗脱条件5BV的水和8BV 60%的乙醇,洗脱速率4BV/h,树脂可反复使用8次,测得纯化后浸膏中凤仙透骨草总黄酮的含量为22.65%,较纯化前提高了 5.16倍。采用牛津杯法考查了凤仙透骨草总黄酮对犬小孢子菌和白色念珠菌的抑制效果,结果显示凤仙透骨草总黄酮对受试菌株均有明显的抑制作用,对于白色念珠菌的抑菌圈直径大于犬小孢子菌。采用CLSI推荐的微量两倍稀释法测定总黄酮对两种真菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),其中白色念珠菌的MIC和MBC分别为0.7813mg/ml和0.7813mg/ml,犬小孢子菌的 MIC和 MBC 分别为 1.563mg/ml 和 3.125mg/ml。表明凤仙透骨草总黄酮对于两种供试真菌均有良好的抑制效果,为凤仙透骨草开发成为中药抗真菌类药物的进一步研究提供借鉴和理论基础。
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