尖叶假龙胆治疗大鼠酒精性肝损伤的有效部位筛选

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尖叶假龙胆(Gentianella acuta(Michx.)Hulten),别名苦龙胆,蒙药称之为“阿古特-其其格”,藏药称“桑地格”,广泛分布于我国东北、内蒙古、山东、山西等地区,其味苦性凉,具有清热利湿,利胆退黄等功效,对黄疸型肝炎、心绞痛、外伤感染等疾病疗效显著,民间用药发现长期嚼服或代茶饮对心脏病有治疗及预防有很大的帮助。目前,有关尖叶假龙胆的成分研究相对较少。按其结构可以分为[口山]酮类、环烯醚萜类、萜类、黄酮类、甾体类、木脂素类等类型化合物为其主要成分。酒精依赖及滥用已成为当今日益严重地公共卫生问题。酒精性肝损伤主要表现为四种形式,酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纤维化、酒精性肝硬化,此几种类型或单独或混合存在。在中国,酒文化有着悠久的历史,传统医学中虽无酒精性肝损伤之病名,但关于其临床表现早有记述。中医学认为其病因与素体禀赋、嗜酒无度有关,其病机可归纳为脾胃气虚、痰湿内阻、水湿内停、气滞血瘀、等几方面。在治法上注重清热化湿、疏肝理气、活血化瘀、软坚散结等治法。中药的成分十分复杂,目前,关于中药及复方的药效物质基础研究备受关注,本实验旨在以中医基础理论为指导,用中药化学结合药效学的研究方法,对尖叶假龙胆单味药进行研究,以此来确定其拮抗大鼠酒精性肝损伤的有效部位,为今后有效成分的研究奠定前期基础。在药学实验方面,本研究利用AB-8大孔树脂对尖叶假龙胆70%、95%乙醇提取液的不同极性部位进行分离富集。在有效部位筛选方面,通过药效学研究的方法,对酒精性肝损伤模型大鼠灌胃尖叶假龙胆全草及大孔树脂水洗部位、30%、50%、70%、95%乙醇洗脱部位,然后对其肝脏称重计算肝指数,测定血清ALT、AST、TG、ALB、TP,及肝组织匀浆MDA、SOD、GSH,同时对肝脏进行HE染色检测其病理变化,通过以上指标的检测,不同极性洗脱部位与全草对比,筛选出有效的洗脱部位,为下一步有效成分的研究打下基础。药效学实验结果表明,尖叶假龙胆全草及其70%乙醇洗脱部位能够减轻肝脏肿胀程度,且能够降低血清ALT、AST、TG、ALB的含量,同时能够降低肝组织中MDA的含量,而且能够提升SOD及GSH的含量,肝组织病理HE染色表现,本品能够改善肝组织病变程度,缓解肝细胞炎性改变,并且以上结果均有统计学意义P<0.05。在有效部位筛选的研究中,统计学分析表明70%乙醇洗脱部位对以上检测指标均有降低,推测尖叶假龙胆对酒精性肝损伤的拮抗中起到协同拮抗的作用,但具体机理尚未知晓需进一步实验研究证实。综合以上研究结果可得出结论尖叶假龙胆及其AB-8大孔树脂70%乙醇洗脱部位能够维护肝脏细胞膜的稳定性,提升其抗氧化能力,降低脂质过氧化反应,对酒精性肝损伤具有一定的保护作用,同时证实了 AB-8大孔树脂70%乙醇洗脱部位为尖叶假龙胆拮抗大鼠酒精性肝损伤的有效部位。
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