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目的:（1）开发一种简单快速有效,适用于基层的DNA纯化分离方法。（2）建立M.ovipneumoniae核酸扩增的简单快速检测技术。（3）解决M.ovipneumoniae感染的控制预防问题,探索并建立一种简单快速、经济的适用于基层的M.ovipneumoniae检测方法。方法:（1）制备超顺磁性Fe3O4 MCNCs及Fe3O4/SiO2 MCNCs,并用MCNCs从不同样本中提取DNA,包括兔全血,兔冷冻血液和感染M.ovipneumoniae的肺组织等,对其纯度、完整性及产量进行验证。（2）针对M.ovipneumoniae heat shock protein 70（Hsp 70）和elongation factor Tu（EF-Tu）基因各设计一套特异性引物,利用环介导等温扩增（LAMP）技术进行核酸扩增,联合侧向流动试纸条技术（LFD）实现核酸扩增可目视化检测,建立M.ovipneumoniae LAMP-LFD快速检测方法,并对其特异性、敏感性及临床应用进行检测。（3）构建M.ovipneumoniae EF-Tu、Hsp 70基因原核表达载体,诱导纯化蛋白并用Western-blot法分析其免疫原性,并以Hsp 70和EF-Tu蛋白为诊断抗原,建立M.ovipneumoniae间接ELISA检测方法,并评估其特异性和灵敏性。结果:（1）制备了粒径大小为150-200 nm的Fe3O4 MCNCs,Fe3O4/SiO2 MCNCs粒径大小为195-300 nm,SiO2包裹的厚度约为25 nm,而且SiO2层完整包裹了Fe3O4 MCNCs,呈单分散状态;VSM检测Fe3O4 MCNCs饱和磁化强度（Ms）为46.2 emu/g,Fe3O4/SiO2 MCNCs测量显示饱和磁化强度（Ms）为33.6 emu/g。MCNCs用于各样本中提取的DNA条带完整,没有明显断裂,浓度和纯度良好,提取效率高。（2）Hsp 70基因LAMP在62℃反应70 min,即可特异性检测M.ovipneumoniae的存在;EF-Tu基因LAMP在62℃反应80 min,即可特异性检测M.ovipneumoniae的存在。M.ovipneumoniae Hsp 70 LAMP-LFD检测方法与病原学检测方法总符合率为94%;而建立的M.ovipneumoniae EF-Tu LAMP-LFD检测方法与病原学检测方法的总符合率为80%,说明建立的M.ovipneumoniae Hsp 70 LAMP-LFD检测方法灵敏度、与病原学检测方法的符合率都高于M.ovipneumoniae EF-Tu LAMP-LFD检测方法。（3）构建的EF-Tu间接ELISA反应条件优化显示,蛋白包被浓度为5μg/mL,一抗最佳稀释浓度为1:50,最佳孵育时间为90 min,封闭液为5%脱脂奶粉,二抗最佳稀释倍数为1:8 000,最佳孵育时间为90 min,特异性与灵敏性良好;该方法与间接血凝法对100份血清进行检测,两者符合率为81%;Hsp 70间接ELISA反应条件优化显示,蛋白包被浓度为0.25μg/mL,一抗最佳稀释浓度为1:50,最佳孵育时间为90 min,封闭液为5%脱脂奶粉,二抗最佳稀释倍数为1:8 000,最佳孵育时间为60 min,特异性与灵敏性良好;该方法与间接血凝法对100份血清进行检测,两者符合率为90%。结论:（1）建立的基于MCNCs提取核酸分离纯化方法,简单快速,不使用蛋白酶K或有毒化合物,为未来核酸的自动化提取,同时也为基层农牧区的核酸快速提取提供有效手段。（2）本研究建立的LAMP-LFD检测M.ovipneumoniae的方法特异性强、灵敏度高并且操作简便快捷等优点,为羊感染M.ovipneumoniae的预防和诊断提供了技术保障。（3）建立的M.ovipneumoniae间接ELISA检测方法对M.ovipneumoniae血清学检测提供快速有效的筛查手段,也可大面积推广使用。