Pokemon在弥漫性大B细胞淋巴瘤和多发性骨髓瘤中的表达和意义

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目的:研究Pokemon在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cellLymphoma,DLBCL)和多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)中的表达,初步探讨Pokemon在DLBCL和MM发病机制中的作用及其可能的分子机制。研究方法:采用免疫组织化学SP法检测Pokemon、p53、Bcl-6、CD10和MUM1蛋白在50例弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和10例反应性增生淋巴结(RLH)中的表达;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法(Western Blot)检测Pokemon在人宫颈癌细胞系Hela、MM细胞系KM3、15例多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞(bone marrow blood mononuclear cells,BMMNCs)和10例健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMNCs)中的表达。结果:1.Pokemon蛋白在50例DLBCL和10例RLH中的表达分别为35例(70.0%)和1例(10.0%),Pokemon蛋白在DLBCL中的表达明显高于在RLH中的表达(P<0.01);Pokemon蛋白在20例GCB(Germinal Center origin of B-cell)型(12/20,60.0%)和30例non-GCB(non-Germinal Center origin of B-cell)型DLBCL病人中(23/30,76.7%)的表达差异无统计学意义(P>0.05);而突变型p53蛋白在GCB型DLBCL中的表达率(5/20,25.0%)明显低于在non-GCB型DLBCL中的表达率(16/30,53.3%)(P<0.05);35例Pokemon蛋白阳性DLBCL中突变型p53蛋白阳性18例、Bcl-6蛋白阳性16例,而在15例Pokemon蛋白阴性DLBCL中突变型p53蛋白阳性3例、Bcl-6蛋白阳性2例,在DLBCL中,Pokemon蛋白表达分别与突变型p53蛋白和Bcl-6蛋白的表达呈正相关。Pokemon蛋白在DLBCL患者年龄和性别上的表达差异无统计学意义(P>0.05)。20例GCB型DLBCL中,发生于淋巴结内者9例,占淋巴结内组(26例)的34.6%,发生于淋巴结外者11例,占淋巴结外组(24例)的45.8%,两分布比率差异无统计学意义(x~2=0.654,P=0.419)。Pokemon蛋白在淋巴结内、外组DLBCL中表达差异无统计学意义(x~2=1.847,P>0.05)。2.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法(Western Blot)检测到Pokemon在人宫颈癌细胞系Hela、MM细胞系KM3均呈过表达,在15例多发性骨髓瘤患者中有6例阳性表达(6/15,40%);而在10例健康人外周血中仅有2例呈低表达(2/10,20%)。结论:1.50例DLBCL中Pokemon蛋白表达率为70.0%,10例对照组中为10.0%,两者之间存在显著差异,与Maeda等检测的130例DLBCL患者的Pokemon蛋白表达率基本相符。Pokemon蛋白在GCB型和non-GCB型DLBCL中表达率分别为60.0%和76.7%,由此看来,Pokemon蛋白在恶性程度较高的non-GCB型的表达率较GCB型有更高趋势,但无统计学意义。本研究检测出突变型p53蛋白在DLBCL中的阳性率为42.0%,显著高于对照组(0.0%),和国内报道结果基本相符。Pokemon蛋白的阳性表达与突变型p53蛋白的阳性表达呈正相关,揭示Pokemon蛋白和突变型p53蛋白共同参与了DLBCL的发生和发展,可能存在Pokemon-p53细胞转化通路在DLBCL的发病中起重要作用。2.Pokemon在KM3多发性骨髓瘤细胞株中过表达,通过半定量分析15例多发性骨髓瘤患者中有4例强阳性,2例阳性,10例健康人仅2例Pokemon弱阳性,初步证明Pokemon在MM中有过表达。
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