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背景:人工关节感染是关节置换手术一个不能完全避免的并发症。尽管其发生率不高,但由于早期诊断困难,治疗复杂,常导致重复感染、骨质严重缺损、关节功能障碍甚至截肢,显著增加治疗费用,给病人和社会造成极大的负担。目前,在假体周围组织或关节液中培养出细菌是诊断人工关节感染的金标准。然而,并不是所有假体周围感染的病例都可以得到阳性微生物培养结果。第一部分超声裂解在人工关节置换术后感染诊断中的应用目的:致病菌在假体表面所形成的生物被膜被认为是细菌培养假阴性和治疗反复迁延不愈的主要原因。超声裂解通过破坏假体表面的细菌生物膜,使病原菌得以释放,从而提高细菌培养。本研究即利用此项技术,探讨其在人工关节置换术后感染诊断中的效率。方法:对临床可疑假体周围感染或考虑假体无菌性松动的病人(共46例)进行翻修手术。将翻修术中取出的假体进行超声震荡处理,并将所得的裂解液进行常规细菌培养。比较普通细菌培养及超声裂解的敏感性及特异性。结果:组织及关节液常规细菌培养的诊断效率无差异。超声裂解的敏感性(64.71%,95%CI:0.46-0.80)高于普通细菌培养(32.35%,95%CI:0.17-0.50,P<0.05)。结论:超声裂解可以提高假体周围感染病原学检出率。第二部分基于16S r RNA的PCR检测技术在人工关节置换术后感染诊断中的应用目的:基于细菌基因高度保守区域的16S r RNA基因的序列比对鉴定技术,是一种建立在基因文库及生物信息学技术上的较为成熟的细菌快速鉴定方法。本研究即是利用此技术,探讨其在诊断假体周围感染的效率。方法:分析6例无菌性松动及22例假体周围感染行人工髋关节翻修患者的资料,根据细菌16S r RNA保守基因片段设计引物,并采用普通PCR及Real time PCR方法检测假体周围组织、关节液中的细菌以诊断假体周围感染。同时,将翻修术中所取得的组织、关节液标本进行常规细菌培养;比较组织及关节液普通细菌培养敏感性,比较组织、关节液常规培养及16S r RNA PCR方法检出细菌的敏感性。结果:组织及关节液常规细菌培养的诊断效率无差异。Real time-PCR方法用于关节液的微生物检出相较于传统PCR方法升高,但用于组织中微生物的检出并未明显提高。同时,PCR方法并未较普通培养灵敏度高。结论:16S r RNA PCR方法在假体周围感染组织及关节液的检出率尚不明确。第三部分超声裂解联合16S r RNA Real-time PCR诊断人工关节感染目的:超声裂解联合16S r RNA Real-time PCR技术在人工关节感染诊断中应用尚不明确,因此本研究旨在探讨其在在诊断假体周围感染的效率。方法:分析29例因假体周围感染或假体无菌性松动而行人工髋关节翻修患者,将翻修术中取出的假体进行超声震荡处理,并经所得裂解液进行常规细菌培养及PCR检测。比较超声裂解及超声裂解联合PCR方法的敏感性、特异性。结果:超声裂解液培养及超生裂解联合PCR的诊断效率无明显差异,但超生裂解联合PCR方法较常规细菌培养的灵敏度高。结论:超声裂解可破坏假体生物膜提高关节感染病原学的检出率,超声裂解联合16S r RNA PCR方法可提高假体周围感染的诊断效率。