人工授精技术作为一种辅助生殖技术,在猪生产中的应用已经越来越广泛。猪精液保存作为人工授精的关键步骤,保护精子在保存期间免受活性氧的氧化损伤以及细菌的污染已经成为提升精液保存质量的关键。绿原酸作为中草药中普遍存在一种抗氧化、抗菌和抗病毒的成分,已经广泛应用在食品加工、化妆品以及医药行业。本研究通过在猪精液稀释液BTS中添加绿原酸用于精液常温保存。首先,本试验通过高通量测序检测大白公猪精液在保存期间细菌的种属及其变化水平,并在体外验证了绿原酸的抑菌和抗氧化的能力;其次探究了不同浓度的绿原酸对精液常温保存的常规指标、抗氧化指标以及抑菌效果,筛选出绿原酸最适的添加浓度;最后,研究了绿原酸对庆大霉素的替代效果,并与庆大霉素联合添加验证绿原酸的替代效果。本研究获得的主要结果如下:1.大白猪精液在常温保存过程中的菌属以革兰氏阴性菌为主,主要为博德特氏菌属、代尔夫特菌属和沙雷氏菌属等;绿原酸浓度在0.02~0.10 g/L时,其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果要弱于0.25 g/L的庆大霉素(P<0.05),但抗氧化性能要强于维生素C(P<0.05)。2.BTS稀释液中添加0~0.10 g/L的绿原酸对精液的保存效果呈先增后减的变化。添加0.06~0.08 g/L的绿原酸能显著提升精子的活力活率、运动性能、质膜完整率以及ATP的水平(P<0.05)。3.添加0.08 g/L的绿原酸能显著提升精液中总抗氧化能力和超氧化物歧化酶的水平,并显著降低丙二醛和活性氧的生成(P<0.05)。4.猪精液中的细菌含量与绿原酸的添加浓度呈负相关,但是绿原酸抑菌效果要次于0.25 g/L的庆大霉素(P<0.05)。0.08 g/L的绿原酸能代替50%的庆大霉素的添加,且二者联合添加可以使得猪精液常温保存时间延长到7天。综上所述,猪精液在常温保存过程中的菌属以革兰氏阴性菌为主;在BTS稀释液中添加0.08 g/L的绿原酸能显著提升精子的活力活率、运动性能、质膜完整性、抗氧化能力以及抑菌能力,但抑菌效果要低于0.25 g/L庆大霉素。通过联合添加0.125 g/L的庆大霉素和0.08 g/L的绿原酸可以使得猪精液保存时间延长至7天。