【摘 要】
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目的:研究用靶向GPC3基因的si RNA干扰人肺腺癌A549细胞中GPC3基因的表达后,对A549细胞生物学行为产生的影响,说明GPC3基因在A549细胞株中的作用,进而为人类肺腺癌的早期诊断
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目的:研究用靶向GPC3基因的si RNA干扰人肺腺癌A549细胞中GPC3基因的表达后,对A549细胞生物学行为产生的影响,说明GPC3基因在A549细胞株中的作用,进而为人类肺腺癌的早期诊断、预测预后及治疗手段提供理论基础。方法:将细胞接种于不含抗生素的培养基中,24h后用Opti-MEM稀释Lipofectamine 2000和siRNA的混合液,再加入到需要转染的细胞中。37℃培养24h后,通过western blot和荧光定PCR检测空白组,NC组及干扰组的细胞GPC3蛋白/基因表达量。通过CCK-8实验、划痕实验以及流式细胞术检测干扰了GPC3基因之后的A549细胞的生物学行为的变化。结果:干扰组GPC 3基因的蛋白及核算表达水平明显低于空白组和NC组,差异具有显著性(P<0.05);而NC组和空白组的表达量没有显著差异。与NC组和空白组A549细胞相比,干扰组的A549细胞迁移和增殖能力明显降低,而细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:利用Lipofectamine 2000介导的基因转染技术成功的干扰了A549细胞中GPC3基因的表达。当GPC3的表达降低时,A549细胞的增殖和迁移能力都减低;相反,A549细胞的凋亡率增加。
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