糖类HPLC-MS分析方法及其质谱裂解规律的研究

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糖类,作为自然界和生物体中广泛存在的物质,是人体重要的营养素,在人体和生物体中起着重要的作用。而近年研究发现糖类除了供能之外,还有抗癌、抗病毒、抗菌以及调节细胞生长和人体免疫功能等功能。所以糖类的研究受到人们越来越多的重视。糖类这些生物分子对紫外没有或者只有微弱的吸收,所以目前主要用滴定法、DNS法、显色试剂-硫酸法、纸色谱、薄层色谱、气相色谱法和高效液相色谱法-化学衍生法来检测糖类。但是这些方法精密度差,不能准确地进行定量且分析时间也较长。为此,本项工作采用HPLC-MS法来检测糖类成分,具有快速、操作简单、准确等特点,测定的灵敏度也得到大大的提高,在糖类检测中有极其重要的意义。近年来,糖类的生物活性成为研究的焦点问题,其中,糖结构的研究具有至关重要的意义。质谱,尤其是GC-MS(EI或CI方式)用于单糖分析已有几十年历史。近年来,各种软电离技术不断诞生,为糖类结构的研究提供了很好的技术手段。本文主要做了以下研究工作:1.综述糖类的研究现状,以及对目前常用的糖类的检测方法进行了讨论,并介绍了高效液相色谱-质谱联用技术在糖类检测领域的优势。2.建立了高效液相色谱-质谱法检测六味地黄丸中水苏糖的方法。该方法具有操作简单、快速、检测限低、可信度高等优点,为其质量控制提供有力依据。3.建立了高效液相-质谱联用方法检测水稻生长过程中葡萄糖、蔗糖、棉籽糖和水苏糖的含量变化。用此方法对不同种类和不同发育时期的水稻种子中的糖类变化进行了动态分析。此方法优化了液相色谱分离条件及质谱响应,并且定性、定量分析了四种目标物,成功用于水稻中单糖和寡糖的检测。4.建立了亲水色谱-质谱联用检测葡萄糖和果糖、蔗糖和麦芽糖、棉籽糖和蔗果三糖、水苏糖和蔗果四糖的方法。5.采用电喷雾离子阱质谱对单糖、双糖、三糖、四糖的基本结构进行分析,探讨它们的质谱裂解规律。
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