灰葡萄孢菌菌株CanBC-3致病力衰退及其机制研究

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灰葡萄孢菌菌株CanBC-3刚分离时为一强毒菌株,在实验室培养一段时间之后,表型发生明显改变,包括致病力衰退、生长缓慢和菌落形态异常等现象。这些变化可能是灰葡萄孢菌致病因子发生变化引起的,对这些因子的研究,有助于深入理解灰葡萄孢菌的致病机制。本研究主要以弱致病性菌株CanBC-3为材料进行了以下研究:首先,对源于菌株CanBC-3的两类灰葡萄孢菌衍生后代进行了致病性测定、培养特性观察和生物量测定。结果表明:以CanBC-3V为代表的衍生菌株为强致病性菌株,菌丝生长较快,菌落扩展均匀,生物量高。而以CanBC-3HV为代表的另一类菌株为弱致病性菌株,菌丝生长慢,菌落扩展不均匀,生物量低。其次,分析了灰葡萄孢菌菌株CanBC-3HV的垂直传染规律和水平传染规律。结果表明:菌株CanBC-3HV可以通过菌核、分生孢子和原生质体再生将它的弱毒特性传染给后代,但是传染频率较低,这种传染称为垂直传染。菌株CanBC-3HV也可以把它的弱毒特性传给其它强毒灰葡萄孢菌菌株,这种传染属于水平传染。结果表明:CanBC-3HV的水平传染具有菌株特异性,即只能传染给CanBC-3来源的强毒菌株,而不能传染给非CanBC-3来源的强毒菌株。再次,比较了灰葡萄孢菌菌株CanBC-3HV(弱致病型)和CanBC-3V(强致病型)在产生酸、毒素、蛋白酶、淀粉酶和果胶酶,以及在形成侵染垫结构等方面的差异。结果表明:致病力弱的菌株CanBC-3HV在产生酸、毒素、蛋白酶和淀粉酶等方面并未受到明显抑制,果胶酶产量稍微受到抑制。但是,菌株CanBC-3HV侵染结构形成率较低,36h仅为3%,低于强毒菌株CanBC-3V,36h可以达到98%。因此初步估计菌株CanBC-3HV是由于菌丝生长受阻而引起的侵袭力衰退。最后,分析了灰葡萄孢菌菌株CanBC-3HV致病力衰退的原因。结果表明:灰葡萄孢菌菌株CanBC-3HV的致病力衰退与dsRNA、内生细菌和转座子无关。此外,本研究观察到一种现象:在灰葡萄孢菌菌株CanBC-3HV菌丝细胞内出现了细胞结构。
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