耐盐果树滨梅微繁殖体系的建立及离体诱导耐盐突变系

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对盐碱化土地的开发利用,能够缓解目前中国农业土地面积缩小,人口增加的压力。科学开发和利用盐碱化土地,有利于今后可持续农业的发展。开发耐盐经济植物,是利用盐碱化土地的有效方式。 本文首先通过组织培养的方法,建立了耐盐果树滨梅(Prunus maritima)的微繁殖体系,研究发现,对于滨梅的种子萌发,以0.02%活性炭加10mg/L BA+改良MS(硝酸氨减半)培养基最为合适,此时种子萌发率可以达到100%,正常苗率达到90%。 对于不定芽的诱导,结果表明,当选用子叶作为外植体时,以1.0mg/LTDZ+0.5mg/L BA+MS培养基效果最好,不定芽萌发率能达到80%,每个子叶上的发芽数能达到4.6±0.35个。当外植体选用一年生的叶片和嫩茎时,在添加了表面活性剂的吐温组,叶片的不定芽诱导率达到53%,嫩茎高达56%,显著高于没有使用表面活性剂的对照组,且嫩茎的萌发率要高于叶片,而叶片诱导不定芽的合适宽度为3-5mm。对于通过愈伤组织诱导不定芽,实验发现最合适的激素配比是:0.25mg/L 2,4-D+0.5mg/L BA+0.25mg/L NAA+0.5mg/L ZT+MS培养基,分化率达94%,平均每个愈伤组织可以产生从芽8.4个。实验亦发现GA对不定芽的萌发有抑制效果,而对于再生芽的萌发,GA有显著的促进作用,在含4.4mg/LBA和0.5mg/L IBA的MS培养基里,加入0.3mg/L GA,通过暗培养处理,每芽尖的从芽萌发数可以达到5.3个,而没有暗培养的只有3.4个,不含GA的更是只有0.7个。 关于愈伤的诱导,实验发现子叶诱导愈伤组织的能力要高于嫩茎和叶片,在1.0mg/L 2,4-D,0.5mg/L BA的MS培养基中,子叶诱导愈伤的频率达83%,其次是嫩茎,达76%,叶片诱导愈伤效果最差,只有23%。 对于从愈伤快速再生分化苗,发现在2.0mg/L ZT和2.0mg/L BA加MS培养基时,对不定芽有最大再生效果,长度可达3.1cm/20d。 生根实验发现,单独使用NAA,对分化苗生根率、生根数和根长度都有最大效果,分别达93%,3.1/棵,4.3±0.53cm。 实验发现,练苗的适宜温度在23℃,试管苗的茎长和根长都大于3cm时使用蛭石作为基质,成活率能够达到56%。 关于升汞对于种子、叶片、嫩茎的毒性实验,实验发现消毒的最佳时间分别为12min、5min、3min。而关于PVP防止愈伤褐化的效果,实验发现10g/L的PVP对于防止愈伤的褐化有很好的效果。 在对滨梅愈伤组织进行耐盐突变体筛选时,初步发现能够产生耐盐突变的培养基极限浓度为1.0%,实验建立了含NaCl0.5%、0.8%、1.0%的耐盐突变细胞系。并检验了SOD,Pro,和Na<+>、K<+>的指标。
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