本实验在优化黄酮提取方案后,进行了体外抗氧化及体外免疫细胞培养、化学性肝损伤保护等研究,探讨虎尾轮黄酮的生物学功能。具体实验如下:1、虎尾轮黄酮提取工艺的优化虎尾轮根经粉碎后,经超声波细胞粉碎机超声(功率800W,时间1Omin,30s/次,每次间隔15s),并以乙醇浓度、提取时间、提取温度和料液比进行单因素分析,结合正交试验,优化其提取工艺;从而得出最优提取条件为:乙醇浓度70%,料液比1:25,提取时间2h,提取温度90℃。以此条件,虎尾轮黄酮的提取率为 6353.18 mg/kg。2、虎尾轮黄酮体外抗氧化作用虎尾轮黄酮经提取后,依次以石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,从而得到氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相。用所得各萃取相分别进行还原力的测定,卵磷脂脂质体抗氧化的测定和清除超氧离子自由基(O2-·)能力的测定;得出实验结果为:在浓度范围内,所用样品对以上实验效果存在一明显的剂量依赖关系,均随其浓度的增大而增大;均以乙酸乙酯萃取相的效果最优。3、虎尾轮黄酮对小鼠生化指标的影响取体重20g左右小鼠84只,随机分为6组,即:空白对照组,模型组,阳性对照组即联苯双酯组(150mg/kg),以及虎尾轮黄酮高、中、低剂量组(450mg/kg、300mg/kg、150mg/kg)。以四氯化碳(CCl4)进行建模,用小鼠血清及肝组织匀浆液分别进行 T-AOC、ALB、TP、AST、ALT、MDA、SOD 和 GSH-Px 等指标的检测;研究得出:与模型组比较,虎尾轮黄酮各剂量组均能分别显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地提高小鼠SOD、T-AOC、GSH-Px、ALB、TP水平和降低AST、ALT、MDA水平。对化学性肝损伤的修复作用效果明显。4、虎尾轮黄酮对小鼠肝脏形态的影响将各实验组的小鼠解剖后取出肝脏置于4℃生理盐水中,进行肉眼观察,然后用薄刀片切取大小适宜的组织块,放入10%甲醛溶液中固定48h以上,进行切片制作。结果显示:与模型组比较,虎尾轮黄酮各剂量组肉眼观察无明显的病理变化,显微结构病理损伤较轻微,出现不同程度的恢复。虎尾轮黄酮对四氯化碳导致的肝损伤有显著保护作用。5、虎尾轮黄酮对免疫指标的影响通过采用MTT法进行体外淋巴细胞转化实验,并进行腹腔巨噬细胞吞噬能力的测定以及对酸性磷酸酶和溶菌酶活性的检测,结果发现,虎尾轮黄酮各剂量组可极显著地(P<0.01)提高酸性磷酸酶和溶菌酶活性,并能明显提高T淋巴细胞、B淋巴细胞的转化增值以及增强巨噬细胞的吞噬功能。