肾消康对糖尿病肾损伤保护作用机制的研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:drhxumingzhu
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目的:观察中药复方肾消康对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗作用及肾脏基因表达的影响,探讨糖尿病肾损伤的发病机制,揭示中药复方肾消康治疗糖尿病肾损伤的作用机理,筛选药效作用靶点,为临床推广应用提供科学依据。方法:选用雄性Wistar大鼠,通过腹腔小剂量多次注射链脲佐菌素加高脂饮食复制糖尿病肾损伤大鼠模型,运用放免、生化、光镜、电镜、免疫组化、美国Affymetrix Rat 2302.0基因表达谱芯片、RT-PCR等检测手段和方法,观察中药复方肾消康对糖尿病肾损伤大鼠一般状况、体重、肾重、肾重指数、FBG、Ins、HBAlc、TC、TG、HDL-c、Scr、BUN、Alb、β2-MG、AngⅡ、GH/IGF-1、TNF-α、IL-2、NF-κB、肾脏组织形态学的影响,尤其对通过聚类分析从肾组织基因表达谱中筛选出的和DN有重要相关性的CXCL10 mRNA、CCL5 mRNA基因表达的影响。结果:(1)糖尿病肾损伤大鼠模型复制成功。(2)肾消康能明显改善DN大鼠糖、脂代谢紊乱,调节胰岛素水平,减轻蛋白非酶糖基化,减少血中肌酐、尿素氮等小分子代谢产物,降低尿微量白蛋白及β2-微球蛋白的排泄。(3)肾消康对DN大鼠AngⅡ、GH/IGF-1、TNF-α、IL-2、NF-κB等均具有良性调节作用。(4)病理结果显示,肾消康能修复DN大鼠肾小球及肾小管的病理损伤,改善DN早期高灌注,高滤过状态,保护肾功能,延缓肾衰竭。(5)对DN大鼠肾组织基因表达谱研究结果显示:①模型组有73个基因表达上调,191个基因表达下调;②肾消康治疗组有168个基因表达上调,17个基因表达下调;③表达趋势相同的基因有65条,其中模型组表达上调、经肾消康治疗后表达下调的有11条;模型组表达下调、经肾消康治疗后表达上调的有54条。(6)荧光定量RT-PCR结果显示:DN大鼠肾组织CXCL10 mRNA和CCL5 mRNA基因在模型组表达上调,经肾消康治疗后表达下调。结论:肾消康能修复DN大鼠受损的肾组织,保护肾功能,对肾组织多条基因的表达均有影响,尤其对肾组织CXCL 10mRNA和CCL5 mRNA基因有良性调节作用,肾消康可通过多途径、多环节、多靶点对糖尿病肾病起到治疗作用,糖尿病肾损伤的分子调控机制可能与肾组织基因表达相关,尤其是肾组织CXCL10 mRNA、CCL5 mRNA基因的过表达可能造成糖尿病肾病的恶性发展。
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