防己（Stephania tetrandra S.Moore）为防己科千金藤属植物,其有效成分生物碱的含量较高,其总生物碱含量大约占2.6-4%左右。防己中的大多数单碱对多种类生物具有多方面的生物活性,其分离提取,分析鉴定,临床药理作用等研究报道较多,而作为农用药物的开发研究较少。中药药效物质与质量控制实验室研究发现该植物具有杀虫、抗病毒等农用活性。为进一步评价防己在新农药开发中的潜力,有必要明确其主要活性成分。本研究在确定最佳比色条件的基础上,进而采用单因素实验以及Box-Behnken响应面试验对提取工艺中的提取时间、提取次数以及料液比三个因素进行优化,最终得到最优工艺提取下的总生物碱,再通过对防己总碱进一步分离得到防己单碱。然后测定其杀虫及抗病毒活性,主要结果如下:（1）在对不同的提取工艺提取生物碱的定量方法进行研究时,对酸性染料、缓冲剂、p H值、萃取剂四个不同因素进行了相应的优化,用于确定最佳实验方案。结果表明,二氯甲烷提取法最佳检测条件为:3 m L溴甲酚绿溶液酸性染料,5 m L邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液,调节p H=4.2,再加入10 m L二氯甲烷萃取剂,在波长为416 nm下所测的吸光度值最大。乙醇提取法最佳检测条件为:3 m L为溴甲酚绿溶液酸性染料,6 m L邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液,9 m L二氯甲烷萃取剂,调节p H=4.6,419 nm下全部检测。（2）在对不同的提取工艺进行优化时,对料液比、提取次数和提取时间三个因素进行Box-Behnken设计。结合本次响应面实验所优化参数,并结合实际,得到二氯甲烷提取法的最佳提取工艺条件为:料液比1:20,超声提取2次、时间为32分钟,得到最大吸光度值0.517,该条件下生物碱含量为0.29 mg/m L,提取率为5.8mg/g,乙醇提取法最佳提取工艺为:料液比1:30,提取3次、提取时间33分钟,得到最大吸光度值0.654,该条件下生物碱含量为0.54 mg/m L,提取率为16.2mg/g。二氯甲烷作为提取剂有价格低廉,易操作等优点,但是二氯甲烷在常温下容易挥发,且有一定的腐蚀性,所以只适用在密闭容器中进行,本次研究的二氯甲烷提取法可以为以后工业化提取提供新思路;乙醇毒性小,价格低廉,在实验室方便操作,黏度小,易过滤,提取率高。因此在后续分离纯化实验中,选用乙醇提取法制得的总生物碱作为分离纯化的的重点。选用上述得到的工艺作为本研究中最佳提取工艺;（3）运用上述步骤优化后的工艺,将生物碱粗提物提出,其在浸膏中的含量为2.3%,在干样中的含量为0.82%。再运用色谱学技术对其进行提取分离,纯化,并利用现代波谱手段进行EI-MS、~1H-NMR和13C-NMR谱测定。从本次实验中一共得到5个生物碱,分别为:粉防己碱、附子碱、木兰花碱、（-）-limacine、leptopyrine,其中leptopyrine首次从防己中分离得到;（4）防己的总生物碱提取物和五种生物碱的抗虫活性试验表明,生物碱结构复杂,对试验害虫表现均出一定的毒杀作用和拒食活性。例如,施用1mg/m L的样液72 h后,总生物碱对小菜蛾和粘虫具有较高的毒杀作用,死亡率分别为70.00%和76.67%,（-）-limacine对蚜虫具有较强的毒杀作用,死亡率为64.44%,leptopyrine对酢浆草茹叶螨具有较强的毒杀活性,死亡率分别为66.67%。对粘虫具有明显的拒食活性。可以推测:本次实验得到的五个生物碱可能不是其毒杀小菜蛾和粘虫的活性成分;（5）防己总生物碱提取物和五种单碱都对烟草花叶病毒TMV有的体外钝化作用,其中总生物碱提取物表现出较好钝化活性,与对照药剂盐酸吗啉胍·乙酸铜相当,另一种生物碱（-）-limacine也表现出较好抗病毒增殖活性。