‘苹果梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.’Pingguoli’)原产于延边,是世界上最抗寒的、罕见大果的、能够着红色的优良梨品种。为进一步从分子水平上研究‘苹果梨’果实着色的生理机制,培育具有自然着色功能的‘苹果梨’红色新品种(系)提供理论依据,本试验以‘苹果梨’果皮为试材,采用同源克隆技术分离得到了果皮花色素苷合成途径中二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase, DFR)和花色素合成酶(anthocyanindin synthase, ANS)基因的全长cDNA序列,进一步对其进行了生物信息学分析；另以未套袋果实为对照,利用紫外分光光度法测定了果实着色过程中不同取样时期的果皮内花色素苷的含量,并应用实时荧光定量PCR技术对目的基因在相应时期果皮中的表达模式进行了分析。主要研究结果如下：1.根据物种水平上DFR和ANS的保守序列设计特异引物,RT-PCR扩增获得‘苹果梨’果皮花色素苷合成相关基因DFR和ANS的全长cDNA序列,命名为PyDFR和PyANS, GenBank登录号分别为KM588896和KM588895。序列分析结果显示,两基因cDNA全长分别为1039bp和1075bp,其ORF分别编码281个和358个氨基酸,相应蛋白质分子质量约为32KDa和40KDa,理论等电点pI为6.32和5.38。2.利用NCBI网站的Blastn和Blastp工具分别对所得序列进行多重比较发现,PyDFR和PyANS与砂梨、西洋梨、苹果等梨属和苹果属植物的相应基因均具有较高的相似性；利用MEGA6软件构建的系统进化聚类结果显示：PyDFR和PyANS氨基酸序列均与砂梨、西洋梨、苹果等蔷薇科植物聚为一类,说明其亲缘关系最近,进一步证实已成功克隆得到‘苹果梨’果皮花色素苷合成相关基因PyDFR和PyANS。3.应用实时荧光定量PCR技术对‘苹果梨’果皮花色素苷合成相关基因PyDFR和PyANS在不同处理的不同取样时期果皮中的表达模式进行了分析。结果显示：套袋‘苹果梨’果实解袋着色过程中PyDFR和PyANS的表达水平与花色素苷含量变化关系密切,表明PyDFR和PyANS在‘苹果梨’果皮花色素苷的积累的过程中起着重要的作用,进而影响‘苹果梨’果实色泽的形成。