论文部分内容阅读
目的：1.考察抗肿瘤药物二去水卫矛醇(DAG)对肿瘤细胞的体外抗肿瘤效应。2.研究DAG诱导肿瘤细胞SMMC-7721的凋亡作用,并探讨其诱导凋亡的作用机制。方法：1.不同浓度的DAG处理肿瘤细胞H460, SGC-7901, BEL-7404和SMMC-772172h后,利用MTT法考察其对肿瘤细胞珠的体外生长抑制作用。2.通过透射电子显微镜(TEM)观察SMMC-7721肿瘤细胞超微结构改变；并运用流式细胞术研究DAG对SMMC-7721细胞凋亡的影响。3.采用RT-PCR法检测DAG作用SMMC-7721细胞后,相关凋亡基因Caspase-3、Bcl-2和Bax等mRNA表达水平的变化。结果：1、DAG对H460, SGC-7901, BEL-7404和SMMC-7721肿瘤细胞有明显的体外增殖抑制作用,并呈剂量依赖关系；药物作用72h后的IC50值分别为15.98μg·mL-1,16.00μg·mL-1,16.73μg·mL-1和16.46μg·mL-12、以浓度为16.0μg·mL-1的DAG处理SMMC-7721细胞24h后,相比较于对照组,电镜下可见DAG组细胞出现胞体变小,染色质浓缩成团并边集等细胞早期凋亡形态特征；流式细胞仪检测结果显示,DAG作用细胞24h后,对照组的凋亡率为(3.57±0.58)%,而给药浓度为4.0μg·mL-1,8.0μg·mL-1和16.0μg·mL-1的细胞凋亡率依次为(6.49±0.70)%,(14.90±0.56)%和(22.47±1.21)%,凋亡率随DAG给药浓度增加而升高。3、PT-PCR结果经分析可知,DAG作用于SMMC-7721细胞24h后,与对照组相比,Caspase-3、Bax和P53的mRNA表达上调,而凋亡抑制因子Survivin的mRNA表达下调,Bcl-2表达变化不明显。结论：1、DAG对H460, SGC-7901, BEL-7404和SMMC-772肿瘤细胞有明显的生长抑制作用,具有体外抗肿瘤作用。2、DAG诱导肿瘤细胞SMMC-7721产生凋亡,其凋亡机制可能是增加了Caspase-3的mRNA表达水平,Caspase-3的表达升高可能与Bax, P53和Survivin的表达改变有关。