柏木易挥发成分分析及其抑菌活性成分的研究

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柏木是柏科柏木属常绿乔木,其材质耐久不腐,香气宜人,不但是民间传统的优质用材和优良的园林绿化树种,也是日用卫生用品通常添加的香料之一。因此,探究柏木易挥发成分及其抑菌活性成分对柏木的合理开发利用具有重要的意义。本文以柏木木材粉末为主要研究对象,对柏木易挥发成分的分离、富集、结构鉴定、含量分析进行了系统的研究;并对易挥发成分中抑菌活性成分进行了筛选及其抑菌性能的研究。其具体研究内容及结果如下:1.建立了SHS-GC-MS联用分析柏木粉易挥发成分的分析方法采用静态顶空(Static Headspace,SHS)-气相色谱-质谱(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)联用法,通过单因素、响应面试验重点对柏木粉中易挥发成分的GC-MS分离检测,进样条件进行了优化;对其各组分采用质谱、保留指数进行了结构鉴定和内标法定量分析。建立了在HP-5MS色谱柱上,程升分离条件为:初温40°C,保持5 min,以4°C/min的速率升至95°C,保持3 min,以3°C/min的速率升温至120°C,保持10 min,以2°C/min的速率升温至165°C,保持5 min。顶空进样参数为:样品用量0.9 g/20.0 mL顶空瓶,平衡温度128°C,平衡时间30 min的SHS-GC-MS联用分析柏木粉易挥发成分的分析方法。共分离得到91种化合物,确定结构60种,占柏木粉易挥发成分总含量的96.018%。2.确定了柏木易挥发成分中的抑菌活性成分选取不同产地和不同品种的柏木粉为研究对象,利用SHS-GC-MS联用分析方法,分别获取不同柏木粉中各组分含量,采用双皿对扣法,分别获取各柏木粉易挥发成分对尖镰孢黄瓜专化型菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)、胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、草莓灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)及平菇菌(Pleurotus ostreatus)的抑菌效果实验数据,然后通过考察柏木粉易挥发主要成分含量与其抑菌率的相关性,其组分含量与抑菌率呈正相关者进行验证。结果表明:柏木粉易挥发成分对尖镰孢黄瓜专化型菌、胶孢炭疽菌、草莓灰葡萄孢菌及平菇菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其活性成分除经纯品验证的柏木脑外,至少还有α-柏木烯和β-柏木烯。该结果为柏木粉的综合利用提供了一定的实验及理论依据。3.柏木脑抑菌活性的应用研究体外实验通过双皿对扣法,体内利用离体果实接种实验,研究柏木脑乙醇溶液对病原菌的抑制效果以及对草莓储藏期灰霉病的防治效果。结果表明:柏木脑乙醇溶液对尖镰孢黄瓜专化型菌、胶孢炭疽菌、草莓灰葡萄孢菌有抑制效果,对草莓储藏期灰霉病有良好的抑制作用,防治效果为70.21%。柏木脑具有开发为新型植物源杀菌剂的潜力。该结果为柏木脑应用于植物病原菌防治提供了一定的实验依据。
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