连作障碍会导致苹果植株生长缓慢、病害严重、土壤理化性状恶化并导致大面积的减产。为有效缓解苹果连作障碍,本研究自山东烟台采集苹果园土壤样品,从中筛选苹果病原真菌拮抗细菌、铁载体产生细菌及根皮苷降解细菌;并通过盆栽试验验证了几株菌对苹果砧木平邑甜茶的促生效果,为苹果连作障碍的防治提供依据。本研究自苹果根际土壤中筛选到促生菌13株,其中根腐病原菌拮抗细菌3株,分别是甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)PQ11及PA19、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)PY7;高产铁载体菌株7株,分别是甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)GEN11及GEN12、粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)PJ3和PK48、暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)PE4、绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PD1、嗜线虫沙雷氏菌(Serratia nematodiphila)PJ6;根皮苷降解菌4株,分别是绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PD1、阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)PD4、地中海假单胞菌(Pseudomonas mediterranea)PD14、嗜线虫沙雷氏菌(Serratia nematodiphila)PK50,为研制苹果专用微生物肥料提供了菌种资源。通过盆栽试验验证了多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)PY7、实验室保存菌种甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)FKM10、路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii)KD49对苹果砧木平邑甜茶的促生效果。结果表明:(1)与CK组相比,施菌50d后施菌处理组平邑甜茶幼苗株高、地径、叶片数开始表现出优势。其中,FKM10处理株高、地径分别在50-90d、70-90d表现出显著性差异;PY7处理平邑甜茶株高、地径、叶片数分别在50-90d、50-110d、50-70d内有显著性差异;KD49处理株高、地径、叶片数分别在50-70d、50-90d、50-70d有显著性差异。三株菌中多粘类芽孢杆菌PY7对平邑甜茶的促生作用时间最长且综合效果最好。施菌后处理组植株总鲜重、地上部分鲜重、地下部分鲜重均高于CK组,其中PY7对植株鲜重的影响最明显,其植株根、茎、叶各部分的干重均高于CK组;KD49对植株干重的影响最明显,在茎干重、根干重具有显著性优势,PY7处理组在茎干重方面具有显著性优势。FKM10对植株钾的积累无明显效果,但能够显著提高植株根、叶中氮、磷的积累;PY7对植株氮、磷的积累影响不明显,但能够显著提高对植株根、茎、叶钾的积累;kd49对苹果植株钾素的积累无明显效果,能够显著增加植株各部分全磷含量的增加及植株茎的氮素积累。(2)与ck组相比,施菌处理组能够在不同程度上提高植株sod、pod酶活性,诱导平邑甜茶抗逆性。除60d外,2-90d内,fkm10处理平邑甜茶sod、pod酶活性高于ck组,并达到显著性差异;kd49、py7处理sod、pod酶活性在施菌后一定时间内显著高于ck组,其中以fkm10对植株防御相关酶活性影响最为显著。(3)与ck组相比,施菌后土壤磷酸酶、脲酶、蔗糖酶活性均得到不同程度的提高,其中py7处理酶活性最高,fkm10处理次之,kd49处理效果最差。施菌处理过氧化氢酶活性降低,fkm10、py7处理组活性有显著性的降低。fkm10处理组土壤速效磷、速效氮含量低于ck组,速效钾含量高于ck组;py7处理组速效磷、速效钾、速效氮含量均低于ck组;kd49处理组土壤速效磷、速效钾、速效氮含量均低于ck组。这与植株全氮、全磷、全钾含量有相反的变化趋势,可能是施菌后菌剂促进植株对速效养分的吸收导致土壤中速效养分的降低。(4)利用illuminamiseq方法测定平邑甜茶根际土壤细菌及真菌群落结构发现:相较于ck组,三个处理组土壤细菌多样性及丰富度有不同程度的提高,土壤真菌多样性及丰富度有不同程度的降低,其中py7处理、kd49处理细菌丰富度优于fkm10处理,但细菌多样性略低于fkm10处理;对土壤真菌多样性及丰富度降低效果最明显的是py7处理,其次为kd49处理,fkm10处理效果略差。这说明菌剂会引起土壤中细菌数量和种类的增加,真菌数量和种类的减少,这对于改善土壤质量、防治连作障碍有重要意义。与ck组相比,fkm10处理相对丰度具有显著性差异的细菌属有10个,其中1个特有属,8个属相对丰度显著提高,苍白杆菌属(ochrobactrum)相对丰度的显著降低;有显著性差异的真菌属11个,其中6个属显著降低,5个属显著增加。py7处理16个细菌属相对丰度显著提高,其中特有属4个;11个真菌属相对丰度有显著差异,其中6个属显著性降低,5个属有显著性提高。kd49处理8个细菌属相对丰度有显著性差异,其中2个特有属,6个属相对丰度显著提高;6个真菌属达到显著性差异,其中3个属有显著性降低,3个属有显著性提高。三株菌中py7及fkm10对土壤群落结构影响更为明显,kd49效果略次之。施菌处理组红细菌属(rhodobacter)等细菌属相对丰度的提高可能对于加快土壤物质转化、提高土壤有机质含量及土壤自毒物质降解具有一定作用。镰刀菌属(Fusarium)、土赤壳属(Ilyonectria)、轮枝属(Lecanicillium)、枝氯霉属(Ramichloridium)等病原菌相对丰度的显著降低及丛赤壳属(Nectria)、单顶孢属(Monacrosporium)等有益菌属相对丰度的显著性增加对于降低土壤病原菌数量、提高植物抗病能力以及减少苹果根际根结线虫数量可能具有重要意义。本研究筛选到多株苹果根际促生菌,为研制苹果专用微生物肥料提供了菌种资源。促生菌的盆栽试验结果显示:三株菌能够显著改善平邑甜茶根际土壤环境、增加有益细菌真菌数量、减少病原真菌数量、促进平邑甜茶植株生长、诱导植株系统抗性,其中多粘类芽孢杆菌PY7及甲基营养型芽孢杆菌FKM10效果较好。这些菌株在缓解苹果连作障碍、控制苹果土传病害及促进苹果生长发育中有重要的应用价值。