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目的:探讨鸡贫血病毒VP3基因在人膀胱癌EJ细胞株中的表达,观察VP3基因、吉西他滨各浓度及VP3基因联合吉西他滨各浓度诱导人膀胱癌EJ细胞株凋亡的效应。方法:采用LipofectamineTM2000介导的基因转染法,将真核表达载体PcDNA3-VP3转染人膀胱癌EJ细胞株,利用RT-PCR技术检测VP3基因在EJ细胞中的表达状况。将吉西他滨分为三个浓度梯度,分别为10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L,然后将EJ细胞分为三组即:单独转染VP3基因组、吉西他滨各浓度组、VP3基因联合吉西他滨各浓度组。进而对这三组细胞分别利用MTT法检测EJ细胞的增殖活性、运用透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变、通过流式细胞仪使用TUNAL法检测细胞凋亡的凋亡率。结果:RT-PCR结果表明,转染PcDNA3-VP3后VP3基因在EJ细胞中得到了表达;光镜和透射电镜下均能观察到凋亡细胞的典型形态学特征。MTT法检测结果显示转染重组质粒PcDNA3-VP3、吉西他滨各浓度、VP3基因联合吉西他滨各浓度的EJ细胞株的增殖活性明显下降（P＜0.01）。TUNAL法检测转染PcDNA3-VP3、10-8mol/L浓度的吉西他滨、VP3基因联合10-8mol/L浓度的吉西他滨后24h、48h、72h的EJ细胞株凋亡率分别为22.8±1.83%、48.8±1.22%、62.20±3.40%,18.3±2.11%、34.8±1.84%、50.5±1.96%,35.2%±1.50%、68.8±1.03%、85.6±3.20%,转染PcDNA3-VP3组高于转染PcDNA3及细胞、脂质体对照组（P＜0.01）,联合组高于转染PcDNA3-VP3组（P＜0.01）。结论:鸡贫血病毒VP3基因的表达能够高效地诱导人膀胱癌EJ细胞株细胞凋亡,联合10-8mol/L浓度的吉西他滨能增加VP3基因诱导人膀胱癌EJ细胞株凋亡,为今后进一步制备和纯化Apoptin融合蛋白及其联合药物抗膀胱癌效应的研究研究奠定了实验基础。