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目的:通过观察调。肾方对慢性肾功能衰竭大鼠的影响,探讨调肾方治疗慢性肾功能衰竭的作用机理,进而阐明从气机论治慢性肾功能衰竭的机理,挖掘治疗慢性肾功能衰竭的中医新理论,为临床应用提供科学依据。
方法:实验采用腺嘌呤灌胃制备大鼠慢性肾功能衰竭模型。Wistar雄性大鼠66只,体重1.70g±10g,随机分为调肾方治疗组、调肾方预防组、正常对照组、模型对照组、尿毒清对照组和包醛氧淀粉对照组,每组11只。将腺嘌呤加入0.2%羧甲基纤维素钠溶液中配制成1.7%混悬液,除正常组外,其余各组按250mg/kg·d灌胃给药,连续给药21天,制作大鼠腺嘌呤慢性肾功能衰竭模型。调肾方预防组于开始造模的第2天给药,予调肾方浓缩液(1.2g/ml)灌胃。造模结束后,正常组和模型组均给予自来水1ml/100g灌胃;尿毒清组,包醛氧淀粉组,调肾方预防组,调肾方治疗组给药剂量均按人与大鼠体表面积等效剂量折算,给药剂量分别为5g/kg·d,6/kg·d,12/kg·d,12/kg·d,每日1次。治疗结束后,观察大鼠一般状态,体重,肾功能,血脂,转化生长因子β(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达变化及肾组织病理学改变。
结果:
1.一般情况以调肾方预防组最好,调肾方治疗组,包醛氧淀粉组次之,尿毒清组最差。各组大鼠在造模前后及治疗后体重做两两比较无明显差异。
2.与模型组相比,各治疗组肾功能CR、BUN及血脂FG、TC均明显降低(P<0.05),调肾方预防组与调肾方治疗组对降低慢性肾功能衰竭大鼠肾功能作用优于其它治疗组(P<0.05)。调肾方预防组降低上述指标的作用较调肾方治疗组无显著性差异(P>0.05)。
3.β采用免疫组化法检测TGF-β1表达,在慢性肾功能衰竭过程中,TGF-β1的表达明显增加(P<0.05),调肾方治疗组、调肾方预防组、尿毒清组和包醛氧淀粉组均可明显降低TGF-β1表达(P<0.05),调肾方各组优于尿毒清组和包醛氧淀粉组(P<0.05),调肾方治疗组同调肾方预防组比较,TGF-β1表达有显著性差异(P<0.05),提示调肾方预防组降低TGF-β1表达效果优于调肾方治疗组。
4.采用免疫组化法检测TNF-α表达,在慢性肾功能衰竭过程中,TNF-α的表达明显增加(P<0.05),调肾方治疗组、调肾方预防组、尿毒清组和包醛氧淀粉组均可明显降低TNF-α表达(P<0.05),调肾方各组优于尿毒清组和包醛氧淀粉组(P<0.05),调肾方预防组与调肾方治疗组无显著性差异(P>0.05)。
结论:调肾方可明显降低CR、BUN及TG、TC水平,具有明显的肾脏保护作用,作用优于包醛氧淀粉和尿毒清颗粒;调肾方各组可明显抑制TGF-β1和TNF-α的表达,表明调肾方可通过减少系膜细胞增殖和细胞外基质沉积,促进细胞外基质降解,减轻肾小管间质纤维化和肾小球硬化而发挥治疗作用;病理学改变提示:调肾方可通过减少2,8-二羟基腺嘌呤结晶体沉积于肾小管,进而抑制腺嘌呤对肾小管、肾小球的损害作用,并且可使受损细胞得到明显的恢复,作用优于包醛氧淀粉和尿毒清颗粒。
调肾方是用升清降浊法治疗肾病的一种思路。清阳得升,浊阴得降,使肾脏开其郁,利其气,恢复其升降出入的能动作用。通过实验研究证明,调肾方治疗慢性。肾功能衰竭效果满意,升清降浊法为临床治疗慢性肾功能衰竭开辟了新的思路。