基于纳米材料和小分子的生物传感器的构建及应用

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纳米材料具有特殊的结构以及由此产生的一系列独特的物理、化学性质,因此它在传感器领域具有广泛的应用前景,吸引了众多研究者的兴趣。本论文首先,将多壁碳纳米管(MWNTs)与纳米颗粒相结合,制备的纳米复合材料用于构建葡萄糖生物传感器,并研究了它的电化学性质;然后,将MWNTs与生物聚合物自组装制备的纳米复合材料用于研究NADH的电化学性质;最后,本文还将小分子自组装固定在电极表面,用于测定溶液中的dsDNA。本文开展的具体研究工作如下: 1.将普鲁士蓝(PB)纳米颗粒和MWNTs分散在壳聚糖(CHIT)基底中,形成了一种新的纳米复合材料。PB纳米颗粒和MWNTs具有协同电催化H2O2的作用。CHIT/MWNTs/PB纳米复合材料修饰的玻碳(GC)电极,能使CHIT/MWNTs/GC电极催化H2O2的还原电流放大35倍,并能使CHIT/PB/GC电极的响应时间由60s缩短到3s。另外,CHIT/MWNTs/PB/GC电极能在较低电位下催化H2O2的还原,因此可抑制抗坏血酸(AA)、尿酸(UA)和醋氨酚(AC)的干扰。将葡萄糖氧化酶作为酶的模型,构建了响应性能较好的葡萄糖生物传感器。该生物传感器测定葡萄糖的线性范围,检测限和响应时间分别为:4μmolL-1~2mmolL-1,2.5μmolL-1,5s。 2.利用CHIT具有生物相容性,MWNTs具有高效电催化H2O2性能及纳米ZrO2能提高固定酶的稳定性等特点,制备了CHIT/纳米ZrO2/MWNTs纳米复合材料,并将葡萄糖氧化酶包埋到此纳米复合膜中,构建了一种新的电流型葡萄糖生物传感器。这种生物传感器为葡萄糖氧化酶提供了一个生物相容性良好的固定基质,可充分保持酶的活性和防止酶从电极表面泄漏。该生物传感器测定葡萄糖具有快速灵敏的响应,其线性范围,检测限和响应的时间分别为:8μmolL-1~3mmolL-1,3.5μmolL-1,6s。该生物传感器制备方法简单、稳定性好,在构建基于检测H2O2的酶的生物传感器有着广泛的应用前景。 3.基于MWNTs(负电荷)和生物聚合物CHIT(正电荷)之间的静电吸附,MWNTs的多层膜可均一、稳定的层层自组装在玻碳电极表面。{CHIT/MWNTs}9膜的扫描电境图表明,膜上的MWNTs以小束或单个管子的形式存在。组装的多层膜用于研究NADH的电催化氧化。{CHIT/MWNTs}9/GC电极可以降低NADH大于350mV氧化过电位。{CHIT/MWNTs}9/GC电极检测NADH的线性范围,检测限和响应时间为8×10-7~1.6×10-3molL-1,0.3μmolL-1,3s。另外,层层组装方法简单,{CHIT/MWNTs}9/GC电极具有较好的稳定性。 4.传统检测DNA的方法是将DNA片断固定在电极表面,然而传统的方法有构建方法繁琐、生物膜不均匀、实验条件要求苛刻、生物分子易失活等缺点。通过自组装的方法把1-萘胺固定在Au电极表面,采用交流阻抗的方法实现了溶液中dsDNA的测定。dsDNA浓度在2×10-3~8×10-3mgmL-1范围内与Ret成线性关系(相关系数为0.975)。
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