中国对虾选育群体的抗病特征分析

来源 :上海水产大学 上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiazibin
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本研究针对中国对虾选育群体抗白斑综合征病毒(White Spot-Syndrome Vires,WSSV)的特征进行了研究。 通过对不同中国对虾家系自然感染WSSV的抗病力比较,分析中国对虾各家系和杂交组合在自然养殖状态下对WSSV的抗病力。1个包括42个全同胞家系的中国对虾选育群体,荧光标记后每个家系各取40尾健康个体混养。发病1周后将所有个体取出,统计各家系的存活率:利用巢式聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),对存活个体进行WSSV检测。存活率的分析结果显示:4个家系的存活率在60%以上,7个家系的存活率在20%以下;存活率与存活个体的、WSSV检测第一次扩增阳性率、第二次扩增阳性率负相关,检验不显著;但是,第一次扩增阳性率与第二次扩增阳性率呈极显著正相关(P<0.01)。进一步分析表明:青岛野生群体内自交产生的一个家系和韩国群体养殖家系与乳山野生群体杂交产生的一个家系在抗病力上显著优于其它家系;经独立样本t检验表明,群体间交配组合的存活率差异不显著:然而,多重比较结果发现,韩国群体养殖家系(♂)与乳山野生群体(♀)杂交后代的存活率(56.20±8.75)显著高于韩国群体养殖家系自交后代(22.50±2.50)(P<0.05),说明该杂交后代在抗WSSV方面有一定程度的杂种优势,而韩国群体养殖家系(♂)和乳山野生群体(♀)的杂交后代所表现的杂种优势(26.95)与其反交后代(3.85)差异显著。表明中国对虾抗WSSV的杂交优势有待更进一步的研究确认。 本研究还通过对中国对虾自然感染与人工感染各家系对WSSV抗病力的比较,探讨了两种感染方式实验对中国对虾抗病力的反映情况。数据采自相同的30个家系,每个家系分成2组,人工感染实验组的死亡情况每2小时记录1次。依据自然感染实验组的死亡情况,取两实验组平均存活率在35%左右时进行统计分析。用四格表的卡方检验分析中国对虾各家系存活率,结果发现23个家系的存活率在两种感染方式实验间差异不显著(P>0.05),两种感染方式实验间家系存活率一致性为77%。用独立样本,检验对两种感染方式实验中4个杂交组合的存活率进行比较,结果发现4个杂交组合的存活率在两种感染方式实验间差异不显著(P>0.05),说明人工感染和自然感染实验对中国对虾抗病力的反映情况基本是一致的。另外,无论是在人工感染实验中,还是在自然感染实验中,5个家系的存活率显著高于样本总体存活率表现较强的抗病力,表明家系选育可能是进行抗WSSV品种选育的重要途径。 对中国对虾两个抗病力不同的群体进行RAPD分析,寻找中国对虾与抗病相关的遗传标记,并分析两个群体的遗传差异。即对人工选育的29个中国对虾半同胞家系进行人工感染WSSV后,选取存活时间最长和存活时间最短各29个个体,组成抗病群体(the longest survival time,LST)和感病群体(the shortest survival time,SST)。用400个随机引物进行RAPD分析,得到与抗病正相关的特异性遗传标记5个,与抗病负相关的特异性遗传标记2个。对14个随机引物在两个群体的扩增位点进行统计,共得到82个位点,其中多态位点34个,占41.46%,两个群体的多态位点比例分别为40.24%和37.8%。Shannons多样性指数估算两个群体的平均遗传多态度为0.2177,LST群体的遗传多态度为0.2190,略高于SST群体0.2163;群体内的遗传变异(Hpop/Hsp)0.9645,可见96.45%的遗传变异来自于群体内,3.55%的变异来源于群体间。统计各座位的基因频率计算出两个群体的遗传分化指数(G<,st>)为0.0294,表明两个群体并没有发生明显的遗传分化。
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