二十五味儿茶丸质量标准研究

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目的:藏医传统药方二十五味儿茶丸具有祛风除痹,消炎止痛的功效,收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》藏药(第一册)。本研究拟通过完善二十五味儿茶丸的质量标准,达到有效的质量控制。方法:采用薄层色谱鉴别(TLC)法对处方中决明子、荜茇、木香、蒺藜进行了鉴别;考察了水分、重量差异、溶散时限、重金属,并采用高效液相色谱(HPLC)法测定毒性成分乌头碱的限量;建立HPLC法测定儿茶素、表儿茶素的含量,并对该方法进行了方法学验证。首次应用“一测多评”法同步测定二十五味儿茶丸中6种成分的含量。以胡椒碱为内参物,确定没食子酸、儿茶素、龙胆苦苷、木香烃内酯、去氢木香内酯相对于胡椒碱的校正因子。并对该方法进行耐用性和系统适应性评价。通过比较相对保留时间差法和相对保留值法对各待测成分没食子酸、儿茶素、龙胆苦苷、木香烃内酯、去氢木香内酯的色谱峰进行定位。采用外标法测定二十五味儿茶丸中胡椒碱的含量,通过相对校正因子计算各待测成分的含量;并比较该方法与外标法测定结果的差异。结果:建立的决明子、荜茇、木香、蒺藜TLC法,在相同色谱条件下各供试品与相应的对照品或对照药材在相同位置均有相同颜色斑点,各斑点清晰、圆整,分离度良好,Rf值适中,无阴性干扰。HPLC法测定乌头碱限量,回归方程为Y=989736.51x+757.10,r=0.9999,在0.02992-0.2244μg范围内线性关系良好,加样回收率102.33%,RSD为2.26%(n=6)。HPLC法测定儿茶素、表儿茶素的含量,儿茶素的回归方程为Y=738457.70x+7961.25,r=0.9997,在0.036-1.800μg范围内线性关系良好,加样回收率98.75%,RSD为1.67%(n=6);表儿茶素的回归方程为Y=641223.65x+11740.32,r=0.9999,在0.039-1.950μg范围内线性关系良好,加样回收率96.73%,RSD为0.77%(n=6)。“一测多评”法同步测定二十五味儿茶丸中6种成分,没食子酸、儿茶素、龙胆苦苷、胡椒碱、木香烃内酯、去氢木香内酯相对于胡椒碱的校正因子为2.561、11.91、6.779、3.688、5.897。色谱条件的微小变动对各成分的相对校正因子无明显影响。待测成分按“一测多评”法与外标法测定结果无显著性差异。没食子酸、儿茶素和龙胆苦苷采用相对保留时间差法定位,其相对保留时间差分别为-66.76、-47.48、-38.81,RSD分别为2.72%、2.44%、1.72%。木香烃内酯、去氢木香内酯采用相对保留值法定位,其相对保留值分别为1.05、1.07,RSD分别为0.71%、0.77%。结论:通过以上研究表明,拟定的质量标准可全面有效地控制二十五味儿茶丸的质量,“一测多评”法测定该制剂6种成分的含量,准确、快速、简便、廉价。
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