目的:急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)是临床常见危重急症,是由多种肺外致病危险因子导致的以血管通透性增加为主要临床表现的肺的炎症综合症,其发病机理非常复杂,易发展为急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),甚至多脏器功能衰竭,病死率高达40%-60%,迄今为止尚无特效的治疗措施。失血性休克由于机体有效循环血量骤然减少和组织低灌注,及随后的缺血/再灌注损伤可导致ALI,作为临床常见急症受到越来越多的关注。近年来研究认为:肠道是导致多脏器功能衰竭的中心器官和始动器官。目前,肠系膜-胸导管淋巴液在重度烧伤、感染中毒性休克等中的作用得到重视,并认为其可以介导严重感染/创伤等引起的肺脏损伤,并进而导致肺和全身的炎症反应。临床及动物实验发现各种原因引起的多器官功能障碍综合症(multiple organs dysfunction syndromes, MODS)常常首先出现ARDS,而肺是首个接纳肠系膜淋巴液的器官,肠系膜淋巴液可能起着介导肺损伤的作用;又有研究显示了休克后收集到的肠系膜淋巴液能损伤或致内皮细胞死亡,增加内皮细胞的渗透性,结扎肠系膜淋巴管能减轻失血性休克后或烧伤后肺损害。这些研究都提示肠系膜淋巴液含有能够介导全身炎症反应时肺损伤的物质。而且在创伤性休克的动物模型或病人的门静脉血的研究中,并没有发现细菌或毒素。同时,休克时门静脉血浆对于血管内皮细胞的损伤作用很轻。Louis报道失血性休克所致的肺损伤和内皮细胞通透性增高是由肠道有害物质经淋巴液而非经门静脉血液所引起的。有关淋巴循环在休克致肺损伤中的作用日益受到关注,但颈淋巴引流对失血性休克并发肺损伤的作用尚未报道。因此本实验通过手术方法制备大鼠失血性休克模型,并在此基础上制作胸导管淋巴引流模型,观察肺脏病理形态学变化,观察MAP值变化,检测动脉血PaO2、PaCO2、pH值,检测血液、肺组织、淋巴液标本中各指标浓度的变化。旨在揭示失血性休克至肺损伤的机制,并发掘有效的干预措施,为指导临床治疗提供实验依据。方法:健康雄性SD大鼠90只,体重350-400g,随机分成三组。三组分别为:颈胸导管置管引流假手术组(SO组);颈胸导管置管+失血性休克组(HS组);颈胸导管置管引流+失血性休克组(TD组)。每组再按时间点休克1.5h,复苏后2h,复苏后6h各分为3小组,共9小组,每小组10只。制备大鼠失血性休克模型,并在此基础上制备胸导管引流模型,建立股静脉补液途径。按规定分组观察肺脏病理形态学变化;观察平均动脉压(MAP)变化;留取血液、淋巴液及组织标本,检测动脉血PaO2、PaCO2、pH值;检测标本的中TNF-a、IL-1β、MDA、MPO含量变化。实验数据利用SPSS16.0软件进行统计学分析。结果:1.不同组别(SO、HS、TD)大鼠肺组织病理形态学观察1.1肺组织大体形态观察:SO组大鼠肺组织肉眼观色泽粉红、膨胀良好,无明显异常改变。HS组可见大鼠肺体积明显增大,重量增加,色泽灰暗,包膜下可见多处点片状出血并随时间延长而加重。TD组可见大鼠肺体积增大,重量增加,色泽较暗,包膜下可见点片状出血并随时间延长而加重。TD组比HS组相应各时间点大鼠肺组织大体改变较轻。1.2镜下组织学观察:SO组肺组织结构完整,肺泡间隔较均匀,肺泡腔清晰,各时间点无明显变化;HS组及TD组肺间质可见充血、水肿、断裂、肺泡融合、炎细胞浸润、出血、局灶性肺不张,随时点延长而更加明显,肺脏病理评分明显高于SO;TD组肺脏病理评分较HS组相应各时间点明显降低。2.不同组别(SO、HS、TD)大鼠平均动脉压(MAP)变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点MAP值明显降低(P<0.01),TD组各时点组比HS组相应各时点MAP值高(P<0.05)。TD组及HS组在休克复苏后,MAP值明显高于休克1.5h时的MAP值(P<0.01)。3.不同组别(SO、HS、TD)大鼠动脉血pH值、PaO2、PaCO2的检测3.1大鼠动脉血pH值变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点pH值明显降低(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点pH值明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组pH值比1.5h组明显降低(P<0.01)。HS组中6h组及2h组pH值比1.5h组明显降低(P<0.01)。3.2大鼠动脉血PaO2变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点PaO2明显降低(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点PaO2明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组PaO2比1.5h组明显降低(P<0.01)。HS组中6h组及2h组PaO2比1.5h组明显降低(P<0.01)。3.3大鼠动脉血PaCO2变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点PaCO2明显降低(P<0.01)。TD组中6h组比HS组中6h组PaCO2明显升高(P<0.01)。HS组中6h组比2h组、1.5h组明显降低(P<0.01)。4.不同组别(SO、HS、TD)大鼠肺组织MDA含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点MDA含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点MDA含量明显降低(P<0.01)。TD组随时间延长MDA含量明显升高(P<0.01)。HS组随时间延长MDA含量明显升高(P<0.01)。5.不同组别(SO、HS、TD)大鼠肺组织MPO含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点MPO含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点MPO含量明显降低(P<0.01)。TD组随时间延长MPO含量明显升高(P<0.01)。HS组随时间延长MPO含量明显升高(P<0.01)。6.大鼠肺组织、血浆、淋巴液TNF-a含量变化6.1肺组织TNF-a含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点TNF-a含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点TNF-a含量明显降低(P<0.01)。TD组与HS组组内均为2h组、6h组TNF-a含量高于1.5h组(P<0.01),6h组TNF-a含量明显低于2h组TNF-a含量(P<0.01)。6.2血浆TNF-a含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点TNF-a含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点TNF-a含量明显降低(P<0.01)。TD组与HS组组内均为2h组、6h组TNF-a含量高于1.5h组(P<0.01),6h组TNF-a含量明显低于2h组TNF-a含量(P<0.01)。6.3淋巴液TNF-a含量变化TD组比SO组相应各时点TNF-a含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h及2h组比1.5h组TNF-a含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组TNF-a含量明显低于2h组TNF-a含量(P<0.01)。7.大鼠肺组织、血浆、淋巴液IL-1β含量变化7.1肺组织IL-1β含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点IL-1β含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点IL-1β含量明显降低(P<0.01)。TD组与HS组组内均为2h组、6h组IL-1β含量高于1.5h组(P<0.01),6h组IL-1β含量明显低于2h含量(P<0.01)。7.2血浆IL-1β含量变化TD组及HS组各时点比SO组相应各时点IL-1β含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比HS组相应各时点IL-1β含量明显降低(P<0.01)。TD组与HS组组内均为2h组、6h组IL-1β含量高于1.5h组(P<0.01),6h组IL-1β含量明显低于6h组IL-1β含量(P<0.01)。7.3淋巴液IL-1β含量变化TD组比SO组相应各时点IL-1β含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组及2h组比1.5h组IL-1β含量明显升高(P<0.01)。TD组中6h组比2h组IL-1β含量明显降低(P<0.01)。结论:1、在SD大鼠失血性休克基础上进行颈部胸导管穿刺、引流的模型制备方法科学、可靠,可重复性好,是一种研究淋巴循环在失血性休克并发肺损伤中作用的比较理想的模型制备方法。2、大鼠失血性休克时,肺脏发生了损伤性病理改变,MAP、动脉血pH值、PaO2、PaCO2均降低,并且休克纠正后仍存在,说明失血性休克可并发肺损伤,且持续到休克纠正后。3、大鼠行胸导管引流后,肺脏病理改变减轻,MAP、动脉血pH值、PaO2、PaCO2均不同程度的升高,说明胸导管引流可减轻休克的程度,从而减轻肺损伤。4、大鼠失血性休克时,肺组织匀浆、血浆及胸导管淋巴液中TNF-a、IL-1β、MDA、MPO的含量均明显升高,并持续到休克纠正后,提示TNF-a、IL-1β、MDA、MPO是失血性休克合并肺损伤的重要炎症介质。5、大鼠行胸导管引流后,肺组织匀浆、血浆及胸导管淋巴液中TNF-a、IL-1β、MDA、MPO的含量均明显降低,说明这一措施阻断了炎性介质经肠系膜淋巴管-胸导管途径进入血液循环,从而保护肺功能,减轻ALI。