栀子豉汤处方筛选及其制剂的研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:by090706
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目的:通过观察栀子豉汤(Zhi-zi-chi Decoction,ZZCD)中栀子(Gardenia jasminoides fruit,GJF)和淡豆豉(Fermented Soybean,FS)比例的不同(ZZCD1-4,1:1、1:2、1:4、2:1,w/w)对其成分栀子苷、染料木素、总环烯醚萜和总黄酮含量的影响,和对脂多糖(Lipopolysaccharid,LPS)致抑郁症小鼠模型的行为学和脑内单胺类神经递质多巴胺(Dopamine,DA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleaceticacid,5-HIAA)的影响,及对栀子苷、染料木素在体内吸收的影响,以对ZZCD进行处方筛选,并确定最佳配伍比例。对最佳配伍比例的ZZCD进行薄膜衣片的制备,并优化其工艺。方法:1.采用煎煮法制备ZZCD1-4。2.分别采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)法测定栀子苷的含量、超高效液相-三重四极杆串联质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法测定染料木素的含量、紫外分光光度(Ultraviolet and Visible Spectrophotometry,UV)法测定总环烯醚萜苷和总黄酮的含量。3.采用腹腔注射LPS的方法结合孤养建立抑郁症小鼠模型。连续灌胃给药ZZCD1-4和盐酸氟西汀7 d,在第7天灌胃后0.5 h腹腔注射LPS,另设模型对照组和常规饲养的正常对照组。检测糖水偏好、体重及摄食量的变化、悬尾实验、强迫游泳实验等行为学指标。采用UPLC-MS/MS法测定小鼠血浆和海马单胺类神经递质水平。4.通过大鼠灌胃给药,探究ZZCD1-4在大鼠体内的药动学。将大鼠随机分为4组,分别口服给药ZZCD1-4,于灌胃后0.25h、0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、6.0h、12.0h、24.0h和36.0h,对大鼠进行眼眶静脉丛取血,处理后用UPLC-MS/MS法检测栀子苷和染料木素的含量,应用DAS2.0药动学软件得到药动学参数及血-药浓度曲线,运用SPSS24.0软件进行统计学分析。5.采用单因素考察,对润湿剂、润滑剂、压片机压力等参数进行优化,确定ZZCD提取物制备薄膜衣片的最佳工艺。6.通过对外观、含量、重量差异和崩解时限的考察以对ZZCD薄膜衣片进行验证性实验。结果:1.栀子苷、总环烯醚萜、染料木素和总黄酮分别在0.051μg·mL-1、712μg·mL-1、201000 ng·mL-1和125250μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(R2>0.999 7),精密度、重复性、稳定性实验RSD值均低于2%,平均回收率分别为97.98%、96.76%、99.78%和98.54%。2.与正常对照组相比,模型组小鼠造模后,体重、摄食量、糖水消耗率显著下降,悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间均显著增加(P<0.01)。与模型组小鼠相比,ZZCD2、ZZCD3组可增加抑郁小鼠的体重和摄食量(P<0.01);ZZCD1、ZZCD2、ZZCD3和ZZCD4组均可增加抑郁小鼠的糖水消耗(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);ZZCD2、ZZCD3组均可以缩短抑郁小鼠在悬尾实验和强迫游泳实验中的不动时间(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01);ZZCD3组可显著增加小鼠海马体和血浆中5-HT、5-HIAA的含量(P<0.01),ZZCD4组可显著增加抑郁小鼠海马体中5-HT和血浆中5-HT、5-HIAA的含量(P<0.05)。3.大鼠血浆中染料木素和栀子苷的检测模式分别为正离子模式和负离子模式。栀子苷和染料木素在1500 ng·mL-1和1100 ng·mL-1范围内均表现出良好的线性关系(R2>0.999 2)。栀子苷和染料木素的日内准确度分别为2.87%、6.52%、0.56%,6.79%、6.22%、1.44%;日间准确度分别为8.32%、2.21%、0.72%,1.59%、3.45%、0.51%。精密度范围为:96.37%106.70%。栀子苷和染料木素的提取回收率分别为98.06±1.82%、97.40±1.80%、94.31±3.25%,98.35±4.10%、95.71±5.92%、96.05±6.75%;基质效应分别为:98.27±2.62%、95.58±1.47%、94.94±2.90%,97.72±3.96%、89.35±10.59%、98.67±4.78%。4.ZZCD薄膜包衣片剂的制备工艺:ZZCD提取物细粉按1:2的比例与淀粉混匀,加入70%乙醇,制软材,用14目筛制粒,干燥,用12目筛整粒,加入硬脂酸镁和交联聚维酮,混匀,压片,包衣,检验,即得。验证性实验三批薄膜衣片重量差异、崩解时限、硬度均符合规定,栀子苷的平均含量为17.341mg·g-1。结论:通过对ZZCD1-4中药效成分的含量变化规律和抗抑郁作用规律研究可以得出,GJF和FS的比例为1:4时为ZZCD的最佳配伍比例。通过单因素考察筛选出的ZZCD薄膜衣片最佳制备工艺合理可行,无不良气味,为后续ZZCD抗抑郁制剂的研究和临床应用提供参考。
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