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TRAIL是一种新兴的诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物，由于其具有选择性的杀伤肿瘤细胞而不伤害正常细胞的特性，目前已经成为大家研究的热点，然而TRAIL单独作用于胰腺癌并不敏感，因此采用联合用药已经成为TRAIL治疗胰腺癌的新手段。本实验首先采用MTT的方法检测了TRAIL单独作用组、喜树碱单独作用组以及二者联合应用对胰腺癌细胞生长抑制及增殖的影响。其次，通过hoechst33258荧光染色来检测TRAIL组、喜树碱组、二者联合组以及对照组细胞凋亡的情况。最后我们通过westernblot的方法来检测各组细胞内是否出现了Caspase级联反应，从而探讨喜树碱联合TRAIL杀伤肿瘤细胞是否为凋亡所引起，同时再用westernblot检测DR4、DR5以及c-Flip在用药前后表达的变化，从而揭示喜树碱增强TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制。实验结果表明：单独应用TRAIL、喜树碱均未引起明显的细胞凋亡及增值抑制，而联合应用组中，喜树碱处理细胞后可以改变其对TRAIL的敏感性，并可以明显增加其对肿瘤细胞的杀伤力和增殖抑制。Hoechst33258荧光染色发现联合用药组的许多细胞出现了细胞核聚集、边缘化、核碎裂等典型细胞凋亡形态，而TRAIL单独作用组则未见细胞出现明显凋亡征象。Western-blot检测发现联合用药后细胞内发生了明显的Caspase级联反应，同时也发现DR4、DR5的表达未见明显上调，而c-Flip表达则明显下调。由此可以得知，经过喜树碱预先处理，可以提高胰腺癌细胞PANC-1对TRAIL的敏感性，增加TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的能力。其机制可能是喜树碱下调了c-Flip的表达，解除了其对Caspase-8的抑制，恢复了信号的传导，从而诱发凋亡的发生。