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目的:研究断乳后长期肠道菌群缺失和菌群自然恢复,来观察微生态菌群的恢复规律和免疫系统的影响变化,阐述肠道菌群与宿主免疫系统的发生与发展关系,为利用肠道菌群改善免疫功能打下基础,也为临床上长期免疫低下患者的免疫功能的恢复,提供新思路。方法:选择断乳后清洁级别Balb/c雄性小鼠60只,分两组,头孢曲松钠灌服组和正常组。头孢曲松钠灌服组小鼠用200mg/ml/kg头孢曲松钠灌服,一日2次,间隔6-8小时,连续灌服90天,之后停止头孢曲松钠干预,观察60天,两组分别于第30天、60天、90天、120天、150天处死小鼠称重,收集样本进行肠道菌群、免疫组织、免疫细胞、免疫分子的检测。应用PCR-DGGE方法对各组小鼠肠道菌群进行分析,对有明显差异的条带进行切胶回收、纯化、测序,比对细菌种类。应用ELISA方法对两组小鼠血清Ig G、IL-4和IL-17水平进行检测;对胸腺中SCF、GMCSF和IL-7水平进行检测;对小肠粘液中s Ig A水平进行检测。应用流式细胞仪对脾脏中T细胞和B细胞的含量进行检测。结果:1.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠体重的影响与正常组比较,头孢曲松钠灌服组小鼠体重在30天时有所升高(p<0.05),随着时间推移,两组小鼠体重均有所上升;头孢曲松钠灌服组小鼠体重始终高于正常组,在停止灌服头孢曲松钠后,灌服组小鼠体重恢复正常。2.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠脾指数和胸腺指数的影响与正常组小鼠相比,头孢曲松钠灌服组断乳小鼠脾指数、胸腺指数没有变化。停止使用头孢曲松钠干预后的第30天,第60天,脾指数、胸腺指数没有变化(p>0.05)。3.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠脾脏内T、B细胞含量的影响与正常组小鼠相比,头孢曲松钠灌服断乳小鼠脾脏内T细胞含量没有变化(p>0.05)。头孢曲松钠灌服的第60天,第90天,脾脏内B细胞含量下降(p<0.05),停止头孢曲松钠干预后的第30天,第60天,脾脏内B细胞含量上升,与正常组无差异(p>0.05)。4.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠血清免疫因子的影响与正常组相比,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠血清Ig G含量在第30天,60天没有变化,在第90天降低(p<0.05),在停止灌服头孢曲松钠后,第30天,60天,小鼠血清Ig G浓度明显降低(p<0.01);与正常组相比,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠血清IL-4含量在第30天、60天有所下降,在第60天明显降低(p<0.01),在90天有所上升(p<0.05)。在停止灌服头孢曲松钠后第30天,60天时,血清IL-4含量有所上升(p<0.05),且高于正常组值趋于稳定;正常组相比,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠血清IL-17含量始终高于正常组(p<0.05),在停止灌服抗生素后第30天,第60天,血清IL-17含量均高于正常值(p<0.05),且在第60天时,血清IL-17含量明显升高(p<0.01)。5.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠胸腺免疫分子的影响与正常组相比,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠胸腺SCF分子含量始终低于正常组(p<0.05),在停止灌服头孢曲松钠后第30天,SCF的含量略有升高,但幅度依然低于正常组(p<0.05);灌服头孢曲松钠组断乳小鼠胸腺GMCSF分子含量始终低于正常组(p<0.05),在停止灌服头孢曲松钠后,GMSCF的含量略有升高,但幅度依然低于正常组(p<0.05);灌服头孢曲松钠组断乳小鼠胸腺IL-7含量始终低于正常组(p<0.05),在停止灌服头孢曲松钠自然恢复后,IL-7含量略有升高,但幅度依然低于正常组(p<0.05)。6.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠小肠粘液s Ig A的影响与正常组相比,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠肠粘液s Ig A含量始终低于正常组(p<0.05),在停止灌服头孢曲松钠后第30天,SCF的含量略有下降,在停止灌服头孢曲松钠后第60天,SCF的含量略有上升,但幅度依然低于正常组(p<0.05)7.长期灌服头孢曲松钠对断乳小鼠肠道菌群的影响与正常组比较,灌服头孢曲松钠期间,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠肠道菌群DGGE电泳条带数显著减少(p<0.05)。停止灌服头孢曲松钠后第30天,灌服头孢曲松钠组断乳小鼠肠道菌群条带数明显增加,至第60天,DGGE电泳条带数恢复,接近正常组断乳小鼠DGGE电泳条带数的水平。结论:1.长期灌服头孢曲松钠可导致断乳小鼠肠道菌群失衡,在停止灌服头孢曲松钠后,菌群得到自然恢复。2.长期菌群失衡可导致断乳小鼠体重升高,脾指数,胸腺指数没有变化,对脾脏内T细胞含量影响不大,可导致脾脏内B细胞含量下降。3.长期菌群失衡可导致断乳小鼠血清Ig G含量降低、血清IL-4含量降低、血清IL-17含量升高;菌群自然恢复后,断乳小鼠血清Ig G含量持续下降、血清IL-4含量和血清IL-17含量较之前无明显变化。4.长期菌群失衡可导致断乳小鼠胸腺SCF含量降低、胸腺GMCSF含量降低、胸腺IL-7含量降低;菌群自然恢复后,断乳小鼠胸腺SCF含量、胸腺GMCSF含量和胸腺IL-7含量较之前无明显变化。