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本课题的研究内容:主要观察基底前脑隔-斜角带(MS-DB)复合体nestin-ir神经元的形态学特征及其超微结构。本研究的结果将为进一步探讨nestin阳性神经元的特性和功能提供资料和线索。
方法:
应用免疫组织化学技术检测nestin在成年大鼠脑内的表达;应用免疫电镜技术观察基底前脑nestin-ir神经元的超微结构。
结果:
在基底前脑,nestin-ir神经元分布于隔一斜角带(MS-DB)复合体嘴一尾侧方向的各个水平,大部分位于中间部位。在MS-DB中,nestin-ir神经元构成一个连续的细胞带。在MS,nestin-ir神经元胞体较小,呈圆形或多极形,发出1-2支较粗的初级树突,其直径逐渐减小。这些树突在MS中垂直走行,常在近基底部分支形成更细小的次级树突;vDB和hDB内的nestin-ir神经元胞体较大,多呈双极或多极形,树突分支比MS中的多。这些树突在DB中向不同方向走行,并发出次级树突。在纹状体,nestin-ir神经元胞体较小,呈卵圆形、梭形或多极形,发出1-3支较粗的初级树突。这些神经元在内侧苍白球和外侧苍白球之间呈带状弧形分布,其中部分沿视束内侧走行,胞体多呈梭形,其直径逐渐减小。
通过电镜观察可发现:免疫反应产物为颗粒状沉淀,电子密度高,弥散分布。在胞体内,主要位于粗面内质网、核糖体和线粒体外膜上以及胞浆内。胞核不着色,且见到核膜凹陷,形成切迹;在树突内,阳性产物分布在胞浆内以及核糖体和线粒体外膜上,未发现树突棘;nestin-ir神经元的胞体和树突所接受的突触可分为轴-树、轴-体、树-树等类型,并均属于Gray Ⅰ型突触,即非对称性突触。突触结构内突触小泡的形态,以清亮圆形小泡为主,混有少量不规则形的清亮小泡。
结论:
1.成年大鼠基底前脑MS、vDB、hDB和纹状体均存在nestin表达。
2.电镜下观察nesin-ir神经元,在胞体内,免疫反应产物为颗粒状沉淀,电子密度高,弥散分布,主要位于粗面内质网、核糖体和线粒体外膜上以及胞浆内。胞核不着色,且常见核膜凹陷形成切迹;在树突,阳性产物分布在胞浆内以及核糖体和线粒体外膜上,未发现树突棘;未发现阳性轴突;
3.nestin-ir神经元的胞体和树突所接受的突触多为非对称性突触,即兴奋性突触。表明免疫反应阴性神经元可以通过直接兴奋的方式影响nestin-ir神经元的活性。