第一部分大鼠胰岛分离纯化及培养条件的优化选择　　 目的:　　 1.通过对比两种不同的胰岛分离纯化介质对胰岛活性的影响，探讨bFGF、SOD对大鼠胰岛在保温培养期间活性的影响，从而得到最优的大鼠胰岛分离纯化及培养条件。方法:1.随机选取20只SD雄性大鼠，按两种不同胰岛分离纯化介质分为2组，每组10只。A组:采用Hank's缓冲液作为胰岛分离纯化介质。B组:采用RPMI1640，内含1.0 g/L NaHCO3，1 mM Na-pyruvate（丙酮酸钠），100μg/mLpenicillin（青霉素），和100 U/mL streptomycin（链霉素），和10％胎牛血清，作为胰岛分离纯化介质。将纯化后胰岛双硫腙(DTZ)染色计数，吖啶橙/碘丙啶(AO/PI)荧光染色法评估胰岛成活率，胰岛素糖刺激释放实验检测胰岛活性。　　 2.通过前面实验得到最优胰岛分离纯化方法，随机选取30只SD雄性大鼠，分成三组，每组10只，A组:纯化后的胰岛于RPMI1640培养液中恒温培养48h，丫啶橙/碘丙啶(AO/PI)荧光染色法评估胰岛成活率，胰岛素糖刺激释放实验检测胰岛活性。B组:bFGF+RPMI1640培养液中恒温培养24h，丫啶橙/碘丙啶(AO/PI)荧光染色法评估胰岛成活率，胰岛素糖刺激释放实验检测胰岛活性。C组:SOD+RPMI1640培养液中恒温培养24h，丫啶橙/碘丙啶(AO/PI)荧光染色法评估胰岛成活率，胰岛素糖释放实验检测胰岛活性。结果与结论:Hank's缓冲液胰岛介质组518.3±44.3个，RPM11640胰岛介质组纯化后每只SD大鼠收获胰岛935.4±54.5个。RPM11640胰岛介质组胰岛细胞存活率、胰岛素刺激指数均高于Hank's缓冲液胰岛介质组2.RPMI1640组与bFGF+RPMI1640组相比胰岛细胞存活率、胰岛素刺激指数无显著性差异，SOD+RPMI1640组胰岛细胞存活率、胰岛素刺激指数均明显高于前面两组，差异具有显著性意义。　　 第二部分家兔颈动脉人造血管移植装置移植及疗效评价　　 目的:探讨家兔颈动脉人造血管移植装置移植手术的操作、术前术后护理及其对糖尿病的治疗作用评价。方法:1.随机选取日本大耳白兔10只，四氧嘧啶(ALX)制作家兔糖尿病模型，高压静电法制备微囊化胰岛，并将其置于人造血管移植装置中，植入糖尿病家兔颈动脉内，术后华法林钠抗凝，青霉素抗感染，血糖仪监测血糖，B超探查移植装置内血液的通畅情况，发生血栓堵塞时取出移植装置，扫描电镜观察装置表面血栓附着情况，评价装置及微囊的血液相容性。结果与结论:术中1只家兔因手术过程中失血过多死亡，其余9只于10d左右移植装置开始发生血栓，血流不畅，于10.7±1.3d左右完全堵塞，装置内无血流。家兔血糖降至正常的时间为5d，移植物存活时间约为8d。　　 第三部分微胶珠化胰岛肌肉内移植治疗小鼠Ⅰ型糖尿病　　 目的:观察包裹胰岛海藻酸钡微胶珠对Ⅰ型糖尿病小鼠的治疗作用。方法:分离纯化SD大鼠胰腺成单个胰岛细胞团，并包裹于海藻酸钡微胶珠内。以腹腔注射链尿佐菌素诱导建立C57BL/6小鼠Ⅰ型糖尿病模型，随机分组:实验组小鼠股二头肌内多点注射包裹胰岛的海藻酸钡微胶珠，对照组小鼠股二头肌内多点注射胰岛，糖尿病对照组及正常对照组小鼠股二头肌内多点注射生理盐水。术后观察小鼠血糖及胰岛微胶珠在肌肉内存在状况。结果与结论:分离纯化后获得高纯度胰岛，每只供体可获得905.4±34.5个，并具有良好生物活性。实验组小鼠血糖降为正常的时间约为6.3d，移植胰岛存活时间大于30d，为微胶珠化胰岛对照组小鼠血糖一直未降至正常，移植胰岛存活时间约为4d。实验组降糖速率明显明显快于对照组和糖尿病对照组。